显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

在显微图像分析中运用机器学习技术

显微成像技术最近取得了令人振奋的进展，因此，在生物医学研究中采集的图像数据无论质量还是数量都呈指数级增长。但是，分析日益复杂的大型图像数据集以提取有意义的信息可能是一个既枯燥又耗时的过程，而且容易出现人为误差和偏差，这经常给许多研究人员造成生产效率瓶颈。

便捷高效的多色成像新方法

之所以开发将高光谱拆分与相量分析相结合的技术，是为了简化从用多个荧光团标记的样本中采集图像的过程。这种组合方法可消除多通道成像中常见的障碍，例如荧光团串扰和低效的每种信号依次成像（这两种情况都可能导致丢失信息）。此外，它还有助于改进图像采集和数据生成，从而提高实验效率。

多通道活细胞成像注意事项

同时多色成像，确保实验成功：活细胞成像实验是了解动态过程的关键。这类实验使我们能够观察记录活体状态下的细胞，而不会可能因固定或终止不同活体过程而产生干扰性伪影。

Image: Adult rat brain. Neurons (Alexa Fluor488, green), Astrocytes (GFAP, red), Nuclei (DAPI, blue). Image courtesy of Prof. En Xu, Institute of Neurosciences and Department of Neurology of the Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, China.

多色显微成像：多通道的重要性

多通道一词是指使用多种荧光染料来检查一个样本中的不同元素。多通道成像可以同时观察相关组分和过程，从而为您的观察添加更多背景信息，最终提供更有意义的结果。它还有助于观察采用其他方法可能会遗漏的相互依赖性。

HeLa Kyoto cells (HKF1, H2B-mCherry, alpha Tubulin, mEGFP). Left image: Maximum projection of a z-stack prior to ICC and LVCC. Right image: Maximum projection of a mosaic z-stack after ICC and LVCC.

如何使用Coral Life（活细胞光电联用）改进活细胞成像

对于活细胞 CLEM 应用而言，光学显微镜成像是在正确的时间以正确的状态识别正确细胞的关键步骤。在本文中，徕卡专家就使用宽场系统的优势以及使用蓝宝石作为细胞培养基底时需要克服的障碍分享了他们的见解。

暗场显微镜

此外，在对材料样本进行成像时，暗场显微镜还能增强图像对比度。暗场光学对比法利用生物标本结构或材料样本的不均匀特征产生的光散射或衍射。

Mouse kidney section with Alexa Fluor™ 488 WGA, Alexa Fluor™ 568 Phalloidin, and DAPI. Sample is a FluoCells™ prepared slide #3 from Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA. Images courtesy of Dr. Reyna Martinez – De Luna, Upstate Medical University, Department of Ophthalmology.

自适应反卷积与 Computational Clearing 结合的力量

反卷积是一种计算方法，用于恢复被点扩散函数（PSF）和噪声源破坏的物体图像。在本技术简介中，您将了解徕卡显微系统提供的反卷积算法如何帮助您克服宽视场 (WF) 荧光显微镜中由于光的波动性和光学元件对光的衍射而造成的图像分辨率和对比度损失。探索由用户控制或自动反卷积的方法，查看并解析更多的结构细节。

肺纤维化研究

本文中所示结果表明，相比明场，使用偏振光可以更清晰地分辨小鼠肺组织中的胶原蛋白纤维化和非纤维化区域。为更好地理解促使瘢痕组织形成的肺纤维化，正常情况下会研究组织中的纤维化区域。分别使用明场和偏振光对小鼠肺组织中的胶原蛋白纤维化病变区域进行成像。成像胶原蛋白时，使用一般的染色法和明场显微镜很难区分纤维化和非纤维化区域。本文中使用偏振光对肺组织进行成像，两个区域呈现出非常明显的颜色差异。

Mouse lymphnode acquired with a THUNDER Imager 3D Cell Culture. Image courtesy of Dr. Selina Keppler, Munich, Germany.

To help you answer important scientific questions, THUNDER Imagers eliminate the out-of-focus blur that clouds the view of thick samples when using camera-based fluorescence microscopes. They achieve…