自动显微系统常见问题
STED超分辨率显微镜允许以远低于衍射极限的分辨率进行成像。STED的关键设计理念依赖于控制荧光基团状态的能力，即发射态对比暗态。通过将适当波长的甜甜圈形激光束（STED激光束）叠加到共聚焦显微镜的激发光束上，将衍射限制光斑内的荧光基团发射光限制在亚衍射区域内部。这种方法迫使荧光基团发射光子前在STED激光束的作用下恢复基态。有效焦距体积可以减少到几十纳米。如需了解更多信息，请参阅：纳米显微镜搭配荧光寿命研究——新一代TauSTED
荧光寿命是荧光基团在通过发射光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。在荧光基团上测量这种发射光的特征时间称为荧光寿命，其范围从皮秒到纳秒。荧光寿命是特定荧光基团的特征参数，会随局部环境或构象状态而变化，同时与荧光基团浓度无关。局部环境因素包括离子浓度、pH值、亲脂性，或存在接近荧光基团的其他分子。这让FLIM成为功能成像的理想选择，用于研究分子功能和相互作用。此外，FLIM可以用于区分具有重叠发射光谱的荧光基团或消除不需要的背景荧光。如需了解有关FLIM的更多信息，请参阅：荧光寿命成像
对厚标本和样品进行深层成像时，由于可见光的散射，使用单光子激发共聚焦荧光显微镜可能存在巨大挑战。单光子激发可实现的最大成像深度约为100微米。相比之下，多光子显微镜利用了红外光的多光子激发特点，因为后者的波长较长、散射减少。这一事实使用多光子显微镜成为对厚标本和样品进行深层组织成像的理想选择。多光子显微镜已经用于观察整个大脑的复杂结构以及研究生物体的肿瘤发育、转移和免疫反应。如需了解详细信息，请参阅教程：利用多光子显微镜进行深层组织成像的原理
一种利用生物标本中分子的内在振动对比进行成像的显微镜。它通常以两种方式成像：相干反斯托克斯拉曼散射（CARS）或受激拉曼散射（SRS）。CRS的最大优点在于不需要对标本进行标记，因为图像对比度来自标本中不同种类分子的光谱特征。由于没有标签，CRS可以让标本在接近原始状态的情况下成像。如需了解更多信息，请参阅：相干拉曼散射（CRS）显微镜
它是共聚焦显微镜的理想光源。白激光（WLL）由高能脉冲红外光纤激光器组成，通过光子晶体光纤馈入以产生光谱连续体。通过声光分光器从该连续体中选择小型谱带。WLL可在整个光谱中提供从蓝色到红色的可调谐激发光。如需了解详细信息，请参阅文章：STELLARIS白激光
对于荧光显微镜，需要过滤并分离荧光基团激发光和发射光的特定色彩谱带。过去通常用滤色片和反射镜等平面光学元件进行滤光和光束分离。这些方法具有规格固定以及转换缓慢等限制因素。一种截然不同的方法就是利用声光元件进行激发控制（借助声光可调滤光器）以及激发发射光分离（借助声光分光器）。这些声光器件可以实现灵活调谐和高速切换。如需了解详细信息，请参阅文章：真共聚焦光谱显微镜系统中的声光学
Light-sheet microscopy, also referred to as selective-plane illumination microscopy, is a gentle way of imaging sensitive samples or fast biological processes in live specimens. The optical scanning is only done in a single plane and detected from the perpendicular direction. The excitation is done with a thin light-sheet that illuminates the focal plane and spares the sample from out-of-focus excitation. DLS microscopy uses a digital camera and is advantageous for fast imaging of live specimens. For more details, refer to the article: Confocal and Digital Light Sheet Imaging