显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

3D rendering of a mouse beta cell with mitochondria (blue), insulin SGs (orange), microtubules (red), nucleus (yellow), and plasma membrane (transparent).

High-Pressure Freezing Protocols for Ultrastructural 3D EM

High pressure freezing (HPF) can help preserve hydrated cells and tissues close to their biological state at the moment of immobilization, supporting more reliable ultrastructural interpretation than…

Micrograph of dinoflagellate cells. Scale bar = 1 µm.

高压冷冻技术如何提升海洋微生物分析效果

在本应用示例中，我们展示了高压冷冻、冷冻替代及超薄切片技术在海洋生物学领域的应用，重点针对甲藻的超微结构分析。EM ICE 设备的便携性使得样本采集后可直接在海洋站进行高压冷冻处理。

如何成功进行活细胞光电关联

Coral Life 提供了简化的活细胞 CLEM 解决方案，用于深入了解细胞成分随时间发生的结构变化。除了工作流程手册中描述的技术处理外，本文还提供了成功进行实验的其他知识。

如何让样品保持在生理状态

Coral Life工作流将动态数据与最佳的样品固定方式(高压冷冻)相结合。然而，如果您的细胞因为温度下降，或缺氧气、二氧化碳或营养物质缺乏而受到损伤，那么再好的样品保存也没有意义。这些因素将影响一系列的生物过程，甚至破坏原超微结构基础，影响您的分析。

将动态活细胞数据融入超微结构

采用徕卡Nano的工作流程，可以避免过去如海底捞针似的寻找。利用光电关联显微技术，在适当的时间直接鉴别出正确的细胞，并将动态的活细胞数据融入其超微结构中。

使用增强功能电子显微镜研究大脑切片中的突触

神经科学的一个基本问题就是突触的结构与其功能特性之间有何关系？过去几十年，电生理学揭示了突触传递机制，而电子显微镜（EM）深入探索了突触形态。用于关联突触生理学和超微结构的方法可以追溯到20世纪中叶。目标是获得突触传递的快照，即捕获电子显微照片中的动态过程。

冷冻电子显微镜的工作流程与仪器配置

冷冻电子显微镜作为一种日益流行的研究大分子复合体结构的模态，已在细胞生物学领域促成了众多新见解。近年来，该技术进一步向原位结构生物学方向拓展，成为解析自然状态下结构的首选技术。同样，冷冻断裂与冷冻扫描电子显微镜（SEM）的应用也日益广泛。

通过光遗传和电刺激技术研究纳米桥接结构和动力学

纳米级超微结构信息通常是由经固定和处理样品的静态图像获得的。但是，这些静态图像只是不断变化的动态结构中的一个瞬间。因此，如何探索动态过程中的特定时间点，是纳米级超微结构研究的一个重大挑战。通过光遗传或电刺激技术，并结合毫秒级样品玻璃化技术探索纳米级超微结构，是一种解决上述问题具有前景的技术。在本应用白皮书的第一部分中，我们将从实际应用角度讨论光刺激辅助的样品玻璃化工作流程。

冷冻替代的简要介绍

冷冻替代是一种在足够低温的条件下进行的脱水过程，以避免形成冰晶，并有效规避在环境温度下脱水后观察到的破坏性影响。在冷冻替代期间，“冷冻”水被有机溶剂溶解，有机溶剂通常也含有化学固定剂。冷冻替代与细胞成分的即刻物理固定（冷冻固定）以及树脂包埋相关联。一旦替代完成，样品会逐渐升温，并与常规制备的样品一样进行进一步处理。与化学固定技术相比，成功的冷冻固定及后续FS处理显示出优良的精细结构保存[2]。即使…