显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Mastering Polymer Sectioning with Helmut Gnaegi

When it comes to ultramicrotomy, few names carry the weight of Helmut Gnaegi. As co-founder of Diatome, a global leader in diamond knife technology, Helmut has spent decades refining the art and…

Complete camera overview of EM grid recorded with 3 channels. Inserts displaying the positions, where superresolved 3D confocal images were recorded. 3D renderings of these positions are shown in the zoomed inserts. Fluorescence channels (nuclei by Hoechst, blue; mitochondria by MitoTracker Green, green; lipid Droplets by Bodipy and Crimson Beads, red). Width of a grid square is 90 ?m, width of a grid bar is 35 ?m. Samples kindly provided by Ievgeniia Zagoriy, Mahamid-Group, EMBL Heidelberg, Germany.

从显微镜到电镜：完整的冷冻光电联用工作流程

在题为“多模态玻璃化征程，从实验台到电子显微镜的冷冻关联工作流程”的网络研讨会上，专家团队（Edoardo D'Imprima、Zhengyi Yang、Andreia Pinto 和 Martin…

Projection of a confocal z-stack. Sum159 cells, human breast cancer cells kindly provided by Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany. Blue–Hoechst - indicates nuclei, Green–MitoTracker mitochondria, and red–Bodipy - lipid droplets

低温光学显微镜的新成像工具

荧光显微镜图像能够为cryo-FIB加工提供定位支持，其质量决定了所制备薄片的结果。本文描述了LIGHTNING技术是如何显著提高图像质量，以及如何利用该技术基于荧光寿命的信息来辨别样品的不同结构。

Correlation of markers in the LM and the FIB image.

冷冻ET（电子断层扫描）是一种专用的透射电子显微镜技术，可以重建观察区域的三维体积。借助先进的冷冻EM（电子显微镜），图像分辨率可以提升到令人难以置信的亚纳米等级。因此，可以在细胞内的原生环境中研究蛋白质以及其他生物分子，从而揭示尚未探明的分子机制。由于细胞和组织必须薄到能够透过电子，样品必须进行切片以获取足够薄的样品体积（薄层）。为对样品中的靶区进行精确的三维定位，冷冻共聚焦显微镜是必不可少的工…

LNG-non-LNGHeLa cells labeled with light blue –Hoechst, Nuclei

精确三维定位，实现EM成像——掌握精髓

低温电子断层扫描（CryoET）是一种成像技术，可以让研究人员以亚纳米分辨率观察蛋白质和其他大生物分子。了解分子的形状和结构，包括口袋和裂隙，可以帮助研究人员设计能够像拼图一样附着于分子的药物。低温ET成像也因此成为了解和治疗疾病和失调的重要基础。

冷冻电子断层扫描

冷冻电子断层扫描(CryoET)用于分辨细胞环境内的生物分子，分辨率达到前所未有的一纳米以下。

如何成功进行活细胞光电关联

Coral Life 提供了简化的活细胞 CLEM 解决方案，用于深入了解细胞成分随时间发生的结构变化。除了工作流程手册中描述的技术处理外，本文还提供了成功进行实验的其他知识。

如何成功应用Coral life

许多电子显微镜（EM）工作流程始于样品固定，随后进行样品准备和电镜成像。然而，表现出有趣行为的样品往往很罕见，找到“合适的细胞”可能耗时且繁琐。活细胞光电联用工作流程允许您在相关生物过程发生时捕捉动态信息，并将这些观察放入其超微结构背景中。Coral life工作流程简化了这一过程，以优化您的表现并提高您的生产力。在本次网络研讨会上，我们将通过一个示例演示Coral…

先进的细胞超微结构研究

冷冻断裂和冷冻蚀刻是研究柔性膜相关结构（如紧密连接或肠道糖萼）的有用工具。冷冻断裂和冷冻蚀刻是两种互补的方法，通过样品玻璃化来保护目标结构，然后断开冷冻标本以揭示内部结构。冷冻蚀刻是一个后续步骤，在真空下表面冰升华以揭示更多细节。在这些技术中，喷镀金属或碳使样品能够直接在冷冻扫描电子显微镜（SEM）中成像，或作为复制膜在透射电子显微镜（TEM）中成像。这对技术用于研究细胞器、膜、层和乳液，特别适用…