显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Zebrafish heart, DAPI (nuclei, blue), Tropomyosin (cardiomyocytes, red) and GFP (primordial cardiac layer, green). Courtesy of Anna Jazwinska, University of Fribourg, Switzerland.

显微镜中的荧光

荧光显微技术是一种特殊的光学显微镜技术。它利用的是荧光色素在一定波长的光激发下发光的能力。通过抗体染色或荧光蛋白标记，可以用这种荧光色素标记感兴趣的蛋白质。这样就可以确定单分子物种的分布、数量及其在细胞内的定位。此外，还可以进行共定位和相互作用研究，使用可逆结合染料（如 Ca2+ 和 fura-2）观察离子浓度，以及观察细胞的内吞和外吞过程。如今，利用荧光显微镜甚至可以对亚分辨率颗粒进行成像。

Virally labeled neurons (red) and astrocytes (green) in a cortical spheroid derived from human induced pluripotent stem cells. THUNDER Model Organism Imager with a 2x, 0.15 NA objective at 3.4x zoom was used to produce this 425 µm Z-stack (26 positions) which is presented here as an Extended Depth of Field (EDoF) projection. Images courtesy of Dr. F. Birey, Dr. S. Pasca laboratory, Palo Alto, CA.

活细胞成像指南

在生命科学各研究领域的广泛应用中，活细胞成像是一种不可或缺的工具，用于观察细胞在尽可能接近活体（即活的、活跃的）状态下的情况。本指南回顾了确保成功进行活细胞成像的各种重要注意事项，并介绍了各种旨在克服常见挑战的高性能解决方案。这些进展使我们能够对细胞生理学和动力学有新的认识。

Shown is the DMi8 inverted microscope which is used for life-science research.

选择研究用显微镜时应考虑的因素

光学显微镜通常是生命科学研究实验室的核心设备之一。它可用于各种应用，揭示许多科学问题。因此，显微镜的配置和功能对其应用范围至关重要，从明视野显微镜到荧光显微镜，再到活细胞成像。本文简要概述了显微镜的相关功能，并总结了在选择研究用显微镜时应考虑的关键问题。

Brain organoid labeled with lamin (green) and tubulin (magenta), acquired using Viventis Deep. Courtesy of Akanksha Jain, Treutlein Lab ETH-DBSSE Basel (Switzerland).

如何深入了解类器官和细胞球模型

在本电子书中，您将了解3D细胞培养模型（如类器官和细胞球）成像的关键注意事项。探索创新型显微镜解决方案，来实时记录类器官和细胞球的动态成像过程。

Image of roundworm C. elegans acquired with a M205 FA fluorescence automated stereo microscope in combination with Rottermann contrast. Areas labelled with mCherry are seen as reddish purple.

线虫研究指南 - 针对线虫的相关工作

本指南概述了可以高效进行线虫的研究显微镜技术。线虫是一种广泛使用的模式生物，与人类有大约 70% 的基因同源性，是研究发育、神经科学、遗传学和衰老的理想生物。它的透明性和易培育性使其成为一个出色的遗传学模型系统。它可以进行高分辨率成像。主要的实验方法包括挑虫、转基因、荧光筛选、成像和记录。

Image: Human stem cell-derived mid brain organoids. Courtesy of Dr Tanya Singh, University of Oxford.

揭开类器官模型在生物医学研究中的秘密

准备深入了解类器官和3D培养物的世界，它们是促进我们了解人类健康的重要工具。浏览这些复杂的结构并获取清晰的图像进行分析是一项挑战。在本次活动中，来自牛津大学和伦敦大学学院的研究人员将与我们一起展示Thunder Imager Cell转盘共聚焦系统如何提供更有说服力的高质量数据，以便深入了解各种模型。

表达 GFP 标记的细胞粘附分子 CD44 的乳腺癌肿瘤细胞的 TIRF 图像，该分子位于细胞膜上，通过 TIRF 成像。

全内反射荧光（total internal reflection fluorescent microscope，TIRF）显微镜

全内反射荧光（TIRF）是荧光显微镜技术中的一项特殊技术，由密歇根大学安娜堡分校的 Daniel Axelrod 于 1980 年代初开发。TIRF 显微镜能提供轴向分辨率低于 100 纳米的超高清晰图像，这使得观察膜相关过程成为可能。

全内反射荧光显微镜（total internal reflection fluorescent microscope，TIRFM）在生命科学研究中的应用

全内反射荧光显微镜的独特之处在于利用衰逝波激发荧光团。与传统的弧光灯、LED 或激光宽场荧光照明方式不同，衰逝波仅能从盖玻片/介质界面开始穿透样本约 100 纳米深度。