显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Patch pipette touching a murine hippocampal neuron. Image courtesy of A. Aguado, Ruhr University Bochum, Germany.

什么是膜片钳技术？

离子通道的生理学一直是神经科学家感兴趣的一个重要话题。诞生于1970年代的膜片钳技术开启了电生理学家的新时代。它不仅可以对整个细胞进行高分辨率电流记录，还可以对切下的细胞膜片进行高分辨率电流记录。甚至可以研究单通道事件。然而，由于需要复杂且高灵敏的设备，广泛的生物学背景和高水平的实验技能，电生理学仍然是最具挑战性的实验室方法之一。

Spirogyra algae (Conjugation), Transmitted Light Differential Interference Contrast.

微分干涉对比（DIC）显微镜

本文阐释了在使用显微镜对未染色透明生物样本进行成像时，微分干涉对比法（DIC）为何是明场照明的绝佳方案。

Image of MDCK (Madin-Darby canine kidney) cells taken with phase contrast.

相差和显微镜

相差是一种光学显微镜技术，用于增加未染色样本的对比度。未染色样本的结构，例如活细胞或其细胞器，在明场照明下观察时可能显得模糊，甚至变得透明。

Phase-contrast image of a MDCK-cell culture and its respective confluency measured by the Mateo TL microscope.

如何使用数字化显微镜测定细胞汇合度

本文介绍了如何以一致性的方式测量细胞汇合度。对于生命科学研究领域，例如癌症生物学、干细胞或再生医学，研究通常需要特定生长条件下的细胞。这些条件包括定期检查的细胞形态和汇合度。

Microscope image of cultured cells at the bottom of a dish.

如何对细胞培养进行快速正确的检测

本文介绍了对培养贴壁细胞系进行传代的一般工作流程及步骤说明。哺乳类细胞体外培养是在癌症、药物开发、组织工程、干细胞、疾病细胞和分子生物学等生物医学研究领域进行临床和药物研究的重要模型。要想成功维持细胞系，需要通过控制生长条件来维持细胞生理和表型的稳定性。定期监测细胞生长，对细胞进行传代培养以确保连续性。

Donor (D) and acceptor (A) molecule which participate in FRET (Förster resonance energy transfer).

荧光寿命成像与荧光共振能量转移

荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。 FLIM将寿命测量与成像相结合：对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码，产生额外的图像反差。因此，FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。…

用MICA完成Caspase 3/7多色检测

Caspases与细胞凋亡过程相关，因此可以利用caspase检测来确定细胞是否正在经历这种程序化的细胞死亡。这些检测可以通过例如流式细胞仪、平板读数仪实现，也可以在显微镜上完成，显微镜可为量化数据补充可见的结构信息。在这篇文章中，我们描述了MICA是如何用于caspase 3/7测定。借助Navigator或像素分类器等工具，MICA让设置、执行和分析caspase…

Identification of distinct structures_roundworm_Ascaris_female

在从图像到图像的搜索中切换到快速查看整个样本概览，并即刻识别重要的样本细节。利用这些知识，使用载玻片、培养皿和多孔板的模板自动设置高分辨率图像采集。LAS X Navigator软件像是样本细胞的GPS，总能为用户指明通向高质量数据的清晰路径，这是生命科学平台STELLARIS和THUNDER成像仪上的一款强大的导航工具。LAS X Navigator支持将宽场、立体或共聚焦实验与舞台应用相结合。

Cellular microtubule network in a fibroblast cell

如何为免疫荧光显微镜制备样本

免疫荧光（IF）是一种用于可视化观察细胞内过程、状态和结构的强大工具。IF制剂可通过多种显微镜技术（如激光共聚焦、宽场荧光、全内反射成像等）来加以分析，具体取决于应用目的或研究人员的关注重点。与此同时，在很多使用至少一套简易荧光显微镜的研究工作组当中，IF早已成为不可缺少的一部分。