显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Example of calibrating a microscope at a higher magnification value using a stage micrometer.

显微镜测量校准：为什么要校准以及如何校准

显微镜校准可确保用于检测、质量控制 (QC)、故障分析和研发 (R&D) 的测量结果准确一致。本文介绍了校准步骤。使用参照物进行校准可获得可重复的结果，并有助于确保与准则和标准一致。为获得准确一致的结果，建议校准显微镜并定期检查。如有需要，可向校准专家寻求支持。

Area of a printed circuit board (PCB) which was imaged with extended depth of field (EDOF) using digital microscopy.

如何形成清晰的图像

在显微镜检查中，景深常被看做经验参数。在实际操作中，会根据数值孔径、分辨率和放大率之间的相关性确定该参数。为了获得最佳视觉效果，现代显微镜的调节设备在景深和分辨率之间实现了最佳平衡，这两个参数在理论上呈负相关。

These images show the microstructure of a hard metal with 10% cobalt which is used for heavy-duty tools. The large increase in magnification of the right image (compared to the left) has a risk of being outside the useful range or, in other words, empty magnification.

当心“无效”放大率

在一个最简化的情况，光学显微镜由一个靠近标本的透镜（物镜）和一个靠近眼睛的透镜（目镜）组成。显微镜放大率是两个显微镜透镜系数的乘积。比如，40倍物镜和10倍目镜可以得到400倍放大率。

Multicolor TauSTED Xtend 775 for Cell Biology applications that require nanoscopy resolution for multiple cellular components. Cells showing vimentin fibrils (AF 594), actin network (ATTO 647N), and nuclear pore basket (CF 680R). Sample courtesy of Brigitte Bergner, Mariano Gonzales Pisfil, Steffen Dietzel, Core Facility Bioimaging, Biomedical Center, Ludwig-Maximilians-University, Munich, Germany.

STED样品制备指南

这份指南旨在帮助用户优化受激发射损耗（STED）纳米成像的样品制备，特别是在使用徕卡微系统的STED显微镜时。它提供了单色STED成像用荧光标记的概述，并对其性能进行了评级。

一份基于高光谱SRS（受激拉曼散射）数据集的8色光谱解混结果，展示了未经处理的新鲜苹果切片的生化结构差异。

如何为受激拉曼散射（SRS）成像制备样品

请参阅以下关于受激拉曼散射（SRS）的样本制备、图像采集、数据分析和流程开发的指南。受激拉曼散射光谱成像技术也被称为SRS显微技术。

Image of a Siemens star, where the diameter of the 1st black line circle is 10 mm and the 2nd is 20 mm, taken via an eyepiece of a M205 A stereo microscope. The rectangles represent the field of view (FOV) of a Leica digital camera when installed with various C-mounts (red 0.32x, blue 0.5x, green 0.63x).

30000:1放大率到底意味着什么？

关于光学显微镜性能的一个重要标准是放大率。本报告将为数字显微镜用户提供有用的指南，以确定放大率值的有用范围。

Micrograph of dinoflagellate cells. Scale bar = 1 µm.

高压冷冻技术如何提升海洋微生物分析效果

在本应用示例中，我们展示了高压冷冻、冷冻替代及超薄切片技术在海洋生物学领域的应用，重点针对甲藻的超微结构分析。EM ICE 设备的便携性使得样本采集后可直接在海洋站进行高压冷冻处理。

The principle of the FusionOptics technology: Of the two separate beam paths (1), one provides depth of field (2) and the other high resolution (3). In the brain, the two images of the sample are merged into a single, optimal 3D image (4).

FusionOptics融合光学（徕卡专利技术）高分辨率和大景深结合

人类对视觉环境的感受，80%通过视觉感知获得。如果没有空间视觉，我们几乎无法确定方向。我们的视觉皮质和大脑皮层通过复杂的过程，巧妙地处理着从眼睛看到的图像信号。最近几十年，神经科学已经大量了解该过程。故由徕卡显微系统、苏黎世大学神经信息学研究所和瑞士联邦理工学院共同开展的一项研究，显示了我们的大脑如何灵活有效地结合视觉信号创造出最佳空间图像。研究结果为立体显微技术创新奠定了基础，该创新从分辨率和聚…

Patch pipette touching a murine hippocampal neuron. Image courtesy of A. Aguado, Ruhr University Bochum, Germany.

什么是膜片钳技术？

离子通道的生理学一直是神经科学家感兴趣的一个重要话题。诞生于1970年代的膜片钳技术开启了电生理学家的新时代。它不仅可以对整个细胞进行高分辨率电流记录，还可以对切下的细胞膜片进行高分辨率电流记录。甚至可以研究单通道事件。然而，由于需要复杂且高灵敏的设备，广泛的生物学背景和高水平的实验技能，电生理学仍然是最具挑战性的实验室方法之一。

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