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STED样品制备指南

免费下载指南,描述了成功进行STED成像的要点

[Translate to chinese:] Multicolor TauSTED Xtend 775 for Cell Biology applications that require nanoscopy resolution for multiple cellular components. Cells showing vimentin fibrils (AF 594), actin network (ATTO 647N), and nuclear pore basket (CF 680R). Sample courtesy of Brigitte Bergner, Mariano Gonzales Pisfil, Steffen Dietzel, Core Facility Bioimaging, Biomedical Center, Ludwig-Maximilians-University, Munich, Germany. Triple_color_fixed_sample_TauSTED_Xtend_2_3.jpg

这份指南旨在帮助用户优化受激发射损耗(STED)纳米成像的样品制备,特别是在使用徕卡微系统的STED显微镜时。它提供了单色STED成像用荧光标记的概述,并对其性能进行了评级。

关键学习点

  • 推荐用于双色和三色STED成像的荧光标记组合,这些组合在检测时能降低串色概率。
  • 讨论了免疫荧光标记的考虑事项以及详细实验方法,以获得高质量的图像,其中包括高信噪比的样品中感兴趣结构的图像。
  • 回顾了上样和基底的重要细节,这些能够实现最佳成像,降低由介质引起的像差和自发荧光。
  • 最后,对于活细胞的STED成像,提到了合适的荧光标记,包括荧光蛋白(FPs)和提供上佳性能的有机荧光染料。

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