显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

STELLARIS 共聚焦显微镜平台的虚拟现实展示

In this webinar, you will discover how to perform 10-color acquisition using a confocal microscope. The challenges of imaged-based approaches to identify skin immune cells. A new pipeline to assess…

FLUOSYNC - 一种快速而温和的多色光谱拆分成像方法

在本白皮书中，我们重点介绍如何使用一种快速、可靠的方法在荧光显微镜下获得高质量多通道图像。FluoSync 将现有的光谱混合拆分方法与同步采集多个光谱探测范围相结合，一步到位。这样，多个荧光团可同时成像，而且无需担心荧光串扰、滤光片的选择或在高速成像下损失重要光子的问题。从样本中获得真正的信号从未如此容易。

Combining spectrally resolved detection and fluorescence lifetime multiplexing

使用有机荧光团的活细胞荧光寿命多标技术

点播网络研讨会：如何利用荧光寿命多标技术结合光谱分辨检测技术对更多亚细胞目标进行成像。

Donor (D) and acceptor (A) molecule which participate in FRET (Förster resonance energy transfer).

荧光寿命成像与荧光共振能量转移

荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。 FLIM将寿命测量与成像相结合：对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码，产生额外的图像反差。因此，FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。…

通过非拟合且简便的 FRET-FLIM 方法可视化蛋白质 - 蛋白质相互作用

了解活细胞中的分子相互作用对于解读大多数细胞功能背后的分子机制至关重要。研究蛋白质-蛋白质相互作用的金标准是福斯特共振能量转移（FRET）。尽管有几种方法可以在生物样品中证明FRET，但使用荧光寿命成像显微镜（FLIM）可以基于仅供体荧光的行为直接量化FRET。

Living HeLa cells stained with WGA-488 (yellow), SPY-Actin (cyan), and SiR-Tubulin (magenta). Instant Computational Clearing (ICC) was applied.

如何进行动态多色延时成像

本文将举例说明 Mica 进行动态活细胞成像的能力。活细胞成像揭示了各种细胞事件。由于其中许多事件具有快速动态性，显微镜成像系统必须足够快才能记录下每一个细节。这种成像系统的一个主要优势是能够同时捕获多个荧光成像通道，以精确地显示它们的时空相关性。

Spectral separation of 11 fluorophores coupled to polystyrene beads on a STELLARIS confocal system.

通过 11 种颜色的光谱分离实现超多标记

荧光显微镜是生命科学研究的基本工具，随着细胞组织和模式生物多色标记策略的发展而不断发展和成熟。分子特异性标记多种物种的能力需要适当的工具来识别样品中的多种荧光标签。严格分离多个标签对于获得有意义的成分、丰度、结构和功能读数至关重要。这种所谓的超多标技术在揭示组织组织、癌症进展、肿瘤免疫相互作用和传染病机制等关键方面已变得十分突出。

Image of murine-brain tissue showing a region removed with UV laser microdissection.

不同组织样品制备方法的RNA质量

本文介绍了样品制备过程和紫外激光显微切片（UV LMD）对小鼠脑组织冷冻切片RNA质量的影响。为在提取RNA时获取良好的结果，从高品质组织开始并在处理前后检查RNA质量至关重要。RNA完整性指数（RIN）以1到10的等级标准来显示样品质量。简言之，RIN数值越高，RNA质量越高。这项研究结果表明，可以利用紫外激光显微切片技术，可以从单个组织细胞中获取品质稳定的RNA。

Projection of a confocal z-stack. Sum159 cells, human breast cancer cells kindly provided by Ievgeniia Zagoriy, Mahamid Group, EMBL Heidelberg, Germany. Blue–Hoechst - indicates nuclei, Green–MitoTracker mitochondria, and red–Bodipy - lipid droplets

低温光学显微镜的新成像工具

荧光显微镜图像能够为cryo-FIB加工提供定位支持，其质量决定了所制备薄片的结果。本文描述了LIGHTNING技术是如何显著提高图像质量，以及如何利用该技术基于荧光寿命的信息来辨别样品的不同结构。