显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

利用直流磁控溅射镀膜仪改进HR-SEM用金属薄膜

制备技术（诸如使用各种涂层方法）在高分辨率扫描电子显微镜（HR-SEM）中起着重要作用。对于生物和合成样品等非导电样品，必须制备薄导电层以防止荷电。

工作流程与协议：如何使用徕卡激光显微切割系统和 Qiagen 试剂盒进行成功的 RNA 分析

激光显微切割（LMD）允许分离单个细胞或染色体，是一种在下游分析核酸内容（通过 PCR 或测序技术）之前进行样本准备的成熟技术。在这里，我们描述了徕卡LMD系统与 Qiagen 试剂盒成功结合的过程，即使在少量样本中也能有效提取核酸。所呈现的工作流程和协议为成功的LMD应用提供了基础，确保在过程中不损失核酸数量，并保持 RNA 的完整性，突显了产品的高质量。

冷冻透射电子显微镜的投入式冷冻技术：应用

低温下观察完全含水、未染色样本的透射电子显微镜（cryo TEM）是结构生物学、细胞生物学、药理学和其他科学分支的通用工具。通过将标本放入冷冻剂中进行超快速冷冻（投入式冻结）是一种常用的方法，用于制备在透射电镜观察的各种标本。本文是对投入式冷冻的补充，介绍了在不同领域使用投入式冷冻标本的三种冷冻TEM应用。

冷冻透射电子显微镜的投入式冷冻技术：基本原理

透射电子显微镜（TEM）所需的高真空度极大地减弱了研究自然存在于水相中的标本的能力：将“湿”标本暴露在远低于水蒸汽压的压力下，将导致水相在真空中迅速沸腾，对标本的结构造成破坏性后果。因此，在常规TEM中使用了各种方法在显微观察前干燥标本——这样一个样品制备步骤，通常导致实验结果出现假象。

Video Tutorials: Filling and Assembling of Different Carriers for High-Pressure Freezing

High pressure freezing (HPF) is a cryo-fixation method primarily for biological samples, but also for a variety of non-biological materials. It is a technique that yields optimal preservation in many…

样本修块简介

使用超薄切片机制作样本超薄切片前需要预制样本。在预制过程中，必须特别留意样本尺寸（切片尺寸）、样本位置（目标定位）和块面边缘精准度。这个过程通常叫做修块，在此过程中样本大多被修块成金字塔截头锥体的形状。

用徕卡EM ACE600电子束对DNA进行甘油喷雾/铂金低角度旋转遮光

生物学中，甘油喷雾/低角度旋转遮光[1]是和其他技术结合，将直径较小导致染色不足的结构可视化的准备技术。该方法常用于含有卷曲螺旋结构域的蛋白质或DNA的标本。

Sample Preparation for GSDIM Localization Microscopy – Protocols and Tips

The widefield super-resolution technique GSDIM (Ground State Depletion followed by individual molecule return) is a localization microscopy technique that is capable of resolving details as small as…

冷冻替代的简要介绍

冷冻替代是一种在足够低温的条件下进行的脱水过程，以避免形成冰晶，并有效规避在环境温度下脱水后观察到的破坏性影响。在冷冻替代期间，“冷冻”水被有机溶剂溶解，有机溶剂通常也含有化学固定剂。冷冻替代与细胞成分的即刻物理固定（冷冻固定）以及树脂包埋相关联。一旦替代完成，样品会逐渐升温，并与常规制备的样品一样进行进一步处理。与化学固定技术相比，成功的冷冻固定及后续FS处理显示出优良的精细结构保存[2]。即使…