显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Zebrafish Whole Brain imaging with Leica SP8 spectral confocal laser scanning microscope

斑马鱼大脑高分辨率全器官成像

结构信息是理解复杂生物系统的关键，而脊椎动物的中枢神经系统是最复杂的生物结构之一。要想从发育中的斑马鱼身上分离出一个完整的大脑，我们需要覆盖大约10平方毫米的区域，深度在毫米范围内。通常，低倍透镜不能提供足够的分辨率来揭示神经组织中复杂结构之间的相互作用。此外，由于散射过程，使用共聚焦显微镜在致密生物组织内成像深度通常限制在大约10微米。

Elucidate cancer development on sub-cellular level by in-vivo like tumor spheroid models.

利用光片显微镜改进三维细胞生物学工作流程

了解癌症发生过程中的亚细胞机制对于癌症治疗至关重要。常见的细胞模型涉及作为单层生长的癌细胞。然而，这种方法忽视了肿瘤细胞与其周围微环境之间的三维相互作用。为了贴近自然环境理解恶性肿瘤的发展和进程，对癌症微环境的详细表征至关重要。

工作流程与协议：如何使用徕卡激光显微切割系统和 Qiagen 试剂盒进行成功的 RNA 分析

激光显微切割（LMD）允许分离单个细胞或染色体，是一种在下游分析核酸内容（通过 PCR 或测序技术）之前进行样本准备的成熟技术。在这里，我们描述了徕卡LMD系统与 Qiagen 试剂盒成功结合的过程，即使在少量样本中也能有效提取核酸。所呈现的工作流程和协议为成功的LMD应用提供了基础，确保在过程中不损失核酸数量，并保持 RNA 的完整性，突显了产品的高质量。

使用钙指示剂 Fura2 的宽场钙成像

在真核细胞中，Ca2+是信号转导通路中最广泛使用的第二信使之一。细胞内的 Ca2+ 水平通常保持较低，因为 Ca2+ 常常与磷酸化和羧酸化化合物形成不溶性复合物。通常，细胞质中的 Ca2+ 浓度在 100 nM 的范围内。作为对刺激的反应，Ca2+ 可以从外部介质或内部储存释放，以提高 Ca2+ 浓度。

QTM B, 1963, the first commercial automated image analysis system for microscope images, based on a TV camera and developed by Metals Research in Cambridge, England.

图像分析 50 年

现代图像分析系统对来自自动显微镜和数码相机的图像执行高度复杂的图像处理功能。50 年前，第一套图像分析系统是模拟系统，以摄像机为基础，面积测量可通过仪表读取。不过，它标志着这一领域自动化的开端。