显微镜知识库

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徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记,你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区,分享您的专业知识!

如何成功进行活细胞光电关联

Coral Life 提供了简化的活细胞 CLEM 解决方案,用于深入了解细胞成分随时间发生的结构变化。除了工作流程手册中描述的技术处理外,本文还提供了成功进行实验的其他知识。

如何成功应用Coral life

许多电子显微镜(EM)工作流程始于样品固定,随后进行样品准备和电镜成像。然而,表现出有趣行为的样品往往很罕见,找到“合适的细胞”可能耗时且繁琐。活细胞光电联用工作流程允许您在相关生物过程发生时捕捉动态信息,并将这些观察放入其超微结构背景中。Coral life工作流程简化了这一过程,以优化您的表现并提高您的生产力。在本次网络研讨会上,我们将通过一个示例演示Coral…

先进的细胞超微结构研究

冷冻断裂和冷冻蚀刻是研究柔性膜相关结构(如紧密连接或肠道糖萼)的有用工具。冷冻断裂和冷冻蚀刻是两种互补的方法,通过样品玻璃化来保护目标结构,然后断开冷冻标本以揭示内部结构。冷冻蚀刻是一个后续步骤,在真空下表面冰升华以揭示更多细节。在这些技术中,喷镀金属或碳使样品能够直接在冷冻扫描电子显微镜(SEM)中成像,或作为复制膜在透射电子显微镜(TEM)中成像。这对技术用于研究细胞器、膜、层和乳液,特别适用…

冷冻光电联用(Cryo-CLEM)之旅

本文主要介绍Cryo-CLEM技术及其为科学家带来的便益。此外,还特别说明了一些相关文献。 近期在冷冻电子显微镜工作流程领域取得的技术进步,让我们能够获取到细胞蛋白质社会学的3D数据,其分辨率更是达到前所未有的1纳米以下。工作流程中有一个步骤,需要从样品获取目标位置纳米级分辨率的图像,而要得到这样的结果,就需要用到冷冻光学显微镜。这种显微镜如果用于低温电子显微镜工作流程,通常就称为Cryo…
The EM ICE Nano loading area

如何让样品保持在生理状态

Coral Life工作流将动态数据与最佳的样品固定方式(高压冷冻)相结合。然而,如果您的细胞因为温度下降,或缺氧气、二氧化碳或营养物质缺乏而受到损伤,那么再好的样品保存也没有意义。这些因素将影响一系列的生物过程,甚至破坏原超微结构基础,影响您的分析。

探索病毒结构与生命周期

SARS-CoV-2疫情始于2019年12月下旬,随后演变为全球大流行,引发世界范围内抗击COVID-19的斗争。持续发展的电子显微技术提供了大量新应用,使研究人员能够研究病毒结构、感染与复制过程。本网络研讨会将概述这些先进技术,并阐释它们如何揭示病毒感染细胞时引发的复杂变化。我们涵盖了当前用于扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)的样品制备流程,包括常温、混合及专用冷冻工作流程。

高压冷冻仪实现快速高质量的玻璃化冷冻

高压冷冻仪采用独特的冷冻原理,仅使用单一加压冷却介质——液氮(LN)。该设计带来三大优势,确保样品玻璃化冷冻的高质量结果。
Cryo FIB lamella - Overlay of SEM and confocal fluorescence image. Target structure in yeast cells (nuclear pore proteine Nup159-Atg8-split Venus, red) marked by an arrow. Scale bar: 5 µm. Alegretti et al.,  Nature 586, 796-800 (2020).

使用冷冻共聚焦显微镜定位活性循环核孔复合物

本文介绍了如何利用冷冻光学显微镜,尤其是冷冻共焦显微镜来提高冷冻工作流程的可靠性。评估了EM网格和样品的质量,并分析了目标结构的分布。本文展示了如何将冷冻共焦3D数据投射到SEM图像上,将感兴趣结构可靠地保留在FIB切割的薄片内,以便在冷冻TEM中进行进一步研究。

使用增强功能电子显微镜研究大脑切片中的突触

神经科学的一个基本问题就是突触的结构与其功能特性之间有何关系?过去几十年,电生理学揭示了突触传递机制,而电子显微镜(EM)深入探索了突触形态。用于关联突触生理学和超微结构的方法可以追溯到20世纪中叶。目标是获得突触传递的快照,即捕获电子显微照片中的动态过程。
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