显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Zebrafish heart, DAPI (nuclei, blue), Tropomyosin (cardiomyocytes, red) and GFP (primordial cardiac layer, green). Courtesy of Anna Jazwinska, University of Fribourg, Switzerland.

显微镜中的荧光

荧光显微技术是一种特殊的光学显微镜技术。它利用的是荧光色素在一定波长的光激发下发光的能力。通过抗体染色或荧光蛋白标记，可以用这种荧光色素标记感兴趣的蛋白质。这样就可以确定单分子物种的分布、数量及其在细胞内的定位。此外，还可以进行共定位和相互作用研究，使用可逆结合染料（如 Ca2+ 和 fura-2）观察离子浓度，以及观察细胞的内吞和外吞过程。如今，利用荧光显微镜甚至可以对亚分辨率颗粒进行成像。

Virally labeled neurons (red) and astrocytes (green) in a cortical spheroid derived from human induced pluripotent stem cells. THUNDER Model Organism Imager with a 2x, 0.15 NA objective at 3.4x zoom was used to produce this 425 µm Z-stack (26 positions) which is presented here as an Extended Depth of Field (EDoF) projection. Images courtesy of Dr. F. Birey, Dr. S. Pasca laboratory, Palo Alto, CA.

活细胞成像指南

在生命科学各研究领域的广泛应用中，活细胞成像是一种不可或缺的工具，用于观察细胞在尽可能接近活体（即活的、活跃的）状态下的情况。本指南回顾了确保成功进行活细胞成像的各种重要注意事项，并介绍了各种旨在克服常见挑战的高性能解决方案。这些进展使我们能够对细胞生理学和动力学有新的认识。

Image of roundworm C. elegans acquired with a M205 FA fluorescence automated stereo microscope in combination with Rottermann contrast. Areas labelled with mCherry are seen as reddish purple.

线虫研究指南 - 针对线虫的相关工作

本指南概述了可以高效进行线虫的研究显微镜技术。线虫是一种广泛使用的模式生物，与人类有大约 70% 的基因同源性，是研究发育、神经科学、遗传学和衰老的理想生物。它的透明性和易培育性使其成为一个出色的遗传学模型系统。它可以进行高分辨率成像。主要的实验方法包括挑虫、转基因、荧光筛选、成像和记录。

使用 Ivesta 3 型体视显微镜观察果蝇（Drosophila melanogaster）的拣蝇过程（分拣果蝇）。刻度线长度为 1 毫米。图片由德国海德堡 EMBL 的 M. Benton 提供。

Drosophila（果蝇）研究显微镜使用指南

一个多世纪以来，果蝇（典型的黑腹果蝇）一直被用作模式生物。原因之一是果蝇与人类共享许多与疾病相关的基因。果蝇经常被用于发育生物学、遗传学和神经科学的研究。果蝇的优点包括易于饲养且成本低廉、繁殖速度快、基因组完全测序以及可获得各种基因品系。使用徕卡显微镜可以进行高效的果蝇研究。

斑马鱼研究指南

在斑马鱼研究过程中，尤其是在筛选、分类、处理和成像过程中，要想获得最佳结果，看到精细的细节和结构非常重要。他们帮助研究人员为下一步做出正确的决定。徕卡体视显微镜以出色的光学性能和分辨率著称，配备透射光基底和荧光照明，为斑马鱼成像提供了合适的解决方案。高分辨率、色彩保真度和最佳对比度使研究人员能够做出具有洞察力的决策。

Brain organoid section (DAPI) acquired using THUNDER Imager Live Cell. Image courtesy of Janina Kaspar and Irene Santisteban, Schäfer Lab, TUM.

研究大脑健康的成像类器官模型

小胶质细胞是特化的脑驻留免疫细胞，在大脑发育、平衡和疾病中发挥着至关重要的作用。然而，到目前为止，模拟人脑环境与小胶质细胞之间相互作用的能力还非常有限。

Mouse cortical neurons. Transgenic GFP (green). Image courtesy of Prof. Hui Guo, School of Life Sciences, Central South University, China

显微镜如何帮助研究机械感受和突触通路

Tobi Langenhan教授使用显微镜研究突触蛋白质组合体，研究粘附性GPCR的机械感受特性，并了解蛋白质动力学及其空间相互作用。

超越反卷积

宽场荧光显微镜通常用于视觉呈现生命科学样本中的结构并获取重要信息。利用荧光蛋白或染料，以高度特异性的方式标记离散的样本部分。为了充分了解某种结构，可能需要以三维方式呈现，但这会对使用显微镜带来某些挑战。

Identification of distinct structures_roundworm_Ascaris_female

在从图像到图像的搜索中切换到快速查看整个样本概览，并即刻识别重要的样本细节。利用这些知识，使用载玻片、培养皿和多孔板的模板自动设置高分辨率图像采集。LAS X Navigator软件像是样本细胞的GPS，总能为用户指明通向高质量数据的清晰路径，这是生命科学平台STELLARIS和THUNDER成像仪上的一款强大的导航工具。LAS X Navigator支持将宽场、立体或共聚焦实验与舞台应用相结合。