显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Zebrafish heart, DAPI (nuclei, blue), Tropomyosin (cardiomyocytes, red) and GFP (primordial cardiac layer, green). Courtesy of Anna Jazwinska, University of Fribourg, Switzerland.

显微镜中的荧光

荧光显微技术是一种特殊的光学显微镜技术。它利用的是荧光色素在一定波长的光激发下发光的能力。通过抗体染色或荧光蛋白标记，可以用这种荧光色素标记感兴趣的蛋白质。这样就可以确定单分子物种的分布、数量及其在细胞内的定位。此外，还可以进行共定位和相互作用研究，使用可逆结合染料（如 Ca2+ 和 fura-2）观察离子浓度，以及观察细胞的内吞和外吞过程。如今，利用荧光显微镜甚至可以对亚分辨率颗粒进行成像。

Shown is the DMi8 inverted microscope which is used for life-science research.

选择研究用显微镜时应考虑的因素

光学显微镜通常是生命科学研究实验室的核心设备之一。它可用于各种应用，揭示许多科学问题。因此，显微镜的配置和功能对其应用范围至关重要，从明视野显微镜到荧光显微镜，再到活细胞成像。本文简要概述了显微镜的相关功能，并总结了在选择研究用显微镜时应考虑的关键问题。

Fluorescence microscope image of a life-science specimen

荧光入门介绍

荧光是George Gabriel Stokes于1852年首次报道的一种现象。他观察到萤石在紫外线照射后开始发光。荧光是光致发光的一种形式，是指一种材料被光照射后会发射出光子。发射光的波长比激发光更长。这种效应又称为斯托克斯位移。

超越反卷积

宽场荧光显微镜通常用于视觉呈现生命科学样本中的结构并获取重要信息。利用荧光蛋白或染料，以高度特异性的方式标记离散的样本部分。为了充分了解某种结构，可能需要以三维方式呈现，但这会对使用显微镜带来某些挑战。

Mouse kidney section with Alexa Fluor™ 488 WGA, Alexa Fluor™ 568 Phalloidin, and DAPI. Sample is a FluoCells™ prepared slide #3 from Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA. Images courtesy of Dr. Reyna Martinez – De Luna, Upstate Medical University, Department of Ophthalmology.

自适应反卷积与 Computational Clearing 结合的力量

反卷积是一种计算方法，用于恢复被点扩散函数（PSF）和噪声源破坏的物体图像。在本技术简介中，您将了解徕卡显微系统提供的反卷积算法如何帮助您克服宽视场 (WF) 荧光显微镜中由于光的波动性和光学元件对光的衍射而造成的图像分辨率和对比度损失。探索由用户控制或自动反卷积的方法，查看并解析更多的结构细节。

引起新型冠状病毒肺炎（Covid-19）的冠状病毒SARS-CoV-2肆虐全球并影响了我们生活的方方面面。对于免疫和治疗方法的搜索研究（即如何抗击该病毒）成为了2020年全人类的第一要务。显微镜在这类研究中起着重要作用。为了了解受体结合、基因组释放、复制、装配和病毒出芽的基本原理以及我们的免疫系统效应，可以使用不同的方法和显微镜。本文概述了为什么显微镜是病毒学和感染生物学的重要工具，并举例说明了不…

清晰对比、无雾的 3D 样本实时图像

历史上，宽场显微镜并不适合对大样本/标本体积进行成像。图像背景（BG）主要来源于观察样本的失焦区域，显著降低了成像系统的对比度、有效动态范围和最大可能的信噪比（SNR）。记录的图像显示出典型的雾霭，并且在许多情况下，无法提供进一步分析所需的细节水平。处理厚三维样本的研究人员要么使用替代显微镜方法，要么尝试通过后处理一系列图像来减少雾霭。

柯勒照明：简史介绍和设置的5个简单步骤

在任何特定光学显微镜调试当中，柯勒照明都是实现最佳成像的最重要且最基本的技术之一。尽管柯勒照明应该视为显微镜设置的常规组成部分，但是许多显微镜学家认为正确的设置过于复杂耗时，因此仍然没有被广泛应用。充分了解显微镜的两个主要部件（光阑和载物台下聚光透镜）在实际操作中的调整后，正确的设置就只需要几分钟的时间。正确对齐的显微镜可以大大改善图像的均匀对比度和照明，从而获得更高的分辨率和观察到更多的细节。在…

Mammalian cell culure. Phase contrast and fluorescence image.

哺乳动物细胞培养的介绍

哺乳动物细胞培养是生命科学的基本支柱之一。如果不具备在实验室中培养细胞的能力，那么细胞生物学、免疫学、肿瘤研究等学科很难实现快速发展。本文概述了哺乳动物细胞培养系统，可以根据其形态、细胞类型和组织对其进行分类。此外，还介绍了适宜的细胞生长条件以及需要使用何种显微镜来观察细胞。