显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Zebrafish heart, DAPI (nuclei, blue), Tropomyosin (cardiomyocytes, red) and GFP (primordial cardiac layer, green). Courtesy of Anna Jazwinska, University of Fribourg, Switzerland.

显微镜中的荧光

荧光显微技术是一种特殊的光学显微镜技术。它利用的是荧光色素在一定波长的光激发下发光的能力。通过抗体染色或荧光蛋白标记，可以用这种荧光色素标记感兴趣的蛋白质。这样就可以确定单分子物种的分布、数量及其在细胞内的定位。此外，还可以进行共定位和相互作用研究，使用可逆结合染料（如 Ca2+ 和 fura-2）观察离子浓度，以及观察细胞的内吞和外吞过程。如今，利用荧光显微镜甚至可以对亚分辨率颗粒进行成像。

Shown is the DMi8 inverted microscope which is used for life-science research.

选择研究用显微镜时应考虑的因素

光学显微镜通常是生命科学研究实验室的核心设备之一。它可用于各种应用，揭示许多科学问题。因此，显微镜的配置和功能对其应用范围至关重要，从明视野显微镜到荧光显微镜，再到活细胞成像。本文简要概述了显微镜的相关功能，并总结了在选择研究用显微镜时应考虑的关键问题。

Zebrafish-embryo image captured using a THUNDER Imager Tissue and live instant computational clearing.

利用快速高对比度成像改进斑马鱼-胚胎筛查

通过这篇文章，您可以了解如何利用 DM6 B 显微镜的高速、高对比度成像技术促进转基因斑马鱼胚胎的筛选，从而确保发育生物学研究的准确定位。

Fluorescence microscopy image of liver tissue where DNA in the nuclei are stained with Feulgen-pararosanilin and visualized with transmitted green light.

落射荧光显微镜和反射对比显微镜

多年来，荧光显微镜一直仅使用透射光和暗场照明。随着时间的推移，对改进照明的需求不断增长，这导致了落射照明（也称为入射光照明）的发展。经过 40 年的发展和改进，落射照明荧光显微镜已成为生命科学、临床医学诊断和材料科学领域常规实验室工作和研究的实用方法。大部分开发工作由 Ploem 集团和 Leitz 公司（现为 Leica Microsystems）完成。

Spirogyra algae (Conjugation), Transmitted Light Differential Interference Contrast.

微分干涉对比（DIC）显微镜

本文阐释了在使用显微镜对未染色透明生物样本进行成像时，微分干涉对比法（DIC）为何是明场照明的绝佳方案。

Image of MDCK (Madin-Darby canine kidney) cells taken with phase contrast.

相差和显微镜

相差是一种光学显微镜技术，用于增加未染色样本的对比度。未染色样本的结构，例如活细胞或其细胞器，在明场照明下观察时可能显得模糊，甚至变得透明。

要用显微镜在高倍镜下检查试样标本，有许多因素需要考虑。其中包括分辨率、数字光圈数值孔径（NA）、物镜的工作距离以及物镜前透镜采集图像所用介质的折射率。在这篇文章中，我们将简要地看一下如何使用浸泡介质在盖玻片和物镜前透镜之间利用浸泡介质帮助提高NA和分辨率。此外，我们还将考虑空气和构成载玻片和、盖玻片的空气和玻璃的折射率，以及当光从一种介质传播到另一种介质时，如何使用浸没介质部分地减少失错配。此外，…

暗场显微镜

此外，在对材料样本进行成像时，暗场显微镜还能增强图像对比度。暗场光学对比法利用生物标本结构或材料样本的不均匀特征产生的光散射或衍射。

相位对应

使用相差光学显微镜，无需染色就可以更大对比度观察各种类型生物标本的结构。