显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Cryo FIB lamella - Overlay of SEM and confocal fluorescence image. Target structure in yeast cells (nuclear pore proteine Nup159-Atg8-split Venus, red) marked by an arrow. Scale bar: 5 µm. Alegretti et al., Nature 586, 796-800 (2020).

使用冷冻共聚焦显微镜定位活性循环核孔复合物

本文介绍了如何利用冷冻光学显微镜，尤其是冷冻共焦显微镜来提高冷冻工作流程的可靠性。评估了EM网格和样品的质量，并分析了目标结构的分布。本文展示了如何将冷冻共焦3D数据投射到SEM图像上，将感兴趣结构可靠地保留在FIB切割的薄片内，以便在冷冻TEM中进行进一步研究。

眼科手术向常规使用术中OCT的阶段迈进

A博士是最早在眼科手术中使用术中OCT的医生之一。自2016年以来，她累积了大量使用各种不同术中OCT系统的临床经验。在本白皮书中，她对自己的个人经验进行了总结。她解释了为什么她相信术中OCT会继续存在，并在眼科手术实践中有一个坚定的未来。

Mouse kidney section with Alexa Fluor™ 488 WGA, Alexa Fluor™ 568 Phalloidin, and DAPI. Sample is a FluoCells™ prepared slide #3 from Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA. Images courtesy of Dr. Reyna Martinez – De Luna, Upstate Medical University, Department of Ophthalmology.

自适应反卷积与 Computational Clearing 结合的力量

反卷积是一种计算方法，用于恢复被点扩散函数（PSF）和噪声源破坏的物体图像。在本技术简介中，您将了解徕卡显微系统提供的反卷积算法如何帮助您克服宽视场 (WF) 荧光显微镜中由于光的波动性和光学元件对光的衍射而造成的图像分辨率和对比度损失。探索由用户控制或自动反卷积的方法，查看并解析更多的结构细节。

弹壳撞针压痕的三维形貌分析

本文根据三维形貌资料讨论了射击后弹壳底火帽形貌、扁度和撞针压痕（弹坑）深度的分析情况。对已射击弹药和未射击弹药的底火帽进行了三维形貌分析。用左轮手枪从3个方向射击弹药：水平、垂直向上、垂直向下。测定了在三种射击条件下底火帽扁度的变化、撞针压痕的深度以及个别特征的可辨性。

Completed Bleb, courtesy of Robert A. Sisk, MD, FACS, Cincinnati Eye Institute.

术中OCT辅助基因治疗

基因增强治疗是一种眼部基因转移方法，用于治疗当功能蛋白不足表现为遗传病时的常染色体隐性或X性染色体连锁视网膜营养不良。这些基因缺陷引发特定视力障碍和/或视网膜变性。近期，基因治疗在视网膜营养不良中的应用引发了人们巨大的兴趣。

How does an Automated Rating Solution for Steel Inclusions Work?

The rating of non-metallic inclusions (NMIs) to determine steel quality is critical for many industrial applications. For an efficient and cost-effective steel quality evaluation, an automated NMI…

钢材质量评估过程中人工评级非金属夹杂物（NMI）的挑战

快速、精确和可靠的非金属夹杂物（NMI）评级对钢材质量评估具有重要作用。在钢铁生产和组件制造过程中，非金属夹杂物（NMI）人工评级是一种常用的方法.

Fluorescence microscopy image on the left with no distinction between the fluorescent signal and background autofluorescence. FLIM was used in the image on the right to differentiate autofluorescence in chloroplasts (blue) from the desired fluorescent signal from the cell membrane (green).

学习如何从共聚焦图像中去除自发荧光

了解自发荧光的常见原因以及如何将其从共聚焦显微镜图像中去除。根据应用的不同，自发荧光的来源可能有很多种，但幸运的是，同样也有很多的解决方案--从更换介质到使用荧光寿命成像和近红外染料。

通过光遗传和电刺激技术研究纳米桥接结构和动力学

纳米级超微结构信息通常是由经固定和处理样品的静态图像获得的。但是，这些静态图像只是不断变化的动态结构中的一个瞬间。因此，如何探索动态过程中的特定时间点，是纳米级超微结构研究的一个重大挑战。通过光遗传或电刺激技术，并结合毫秒级样品玻璃化技术探索纳米级超微结构，是一种解决上述问题具有前景的技术。在本应用白皮书的第一部分中，我们将从实际应用角度讨论光刺激辅助的样品玻璃化工作流程。