显微镜知识库

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

Mouse kidney section with Alexa Fluor™ 488 WGA, Alexa Fluor™ 568 Phalloidin, and DAPI. Sample is a FluoCells™ prepared slide #3 from Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA. Images courtesy of Dr. Reyna Martinez – De Luna, Upstate Medical University, Department of Ophthalmology.

自适应反卷积与 Computational Clearing 结合的力量

反卷积是一种计算方法，用于恢复被点扩散函数（PSF）和噪声源破坏的物体图像。在本技术简介中，您将了解徕卡显微系统提供的反卷积算法如何帮助您克服宽视场 (WF) 荧光显微镜中由于光的波动性和光学元件对光的衍射而造成的图像分辨率和对比度损失。探索由用户控制或自动反卷积的方法，查看并解析更多的结构细节。

弹壳撞针压痕的三维形貌分析

本文根据三维形貌资料讨论了射击后弹壳底火帽形貌、扁度和撞针压痕（弹坑）深度的分析情况。对已射击弹药和未射击弹药的底火帽进行了三维形貌分析。用左轮手枪从3个方向射击弹药：水平、垂直向上、垂直向下。测定了在三种射击条件下底火帽扁度的变化、撞针压痕的深度以及个别特征的可辨性。

Completed Bleb, courtesy of Robert A. Sisk, MD, FACS, Cincinnati Eye Institute.

术中OCT辅助基因治疗

基因增强治疗是一种眼部基因转移方法，用于治疗当功能蛋白不足表现为遗传病时的常染色体隐性或X性染色体连锁视网膜营养不良。这些基因缺陷引发特定视力障碍和/或视网膜变性。近期，基因治疗在视网膜营养不良中的应用引发了人们巨大的兴趣。

钢夹杂物自动评级解决方案如何工作？

对非金属夹杂物（NMI）进行评级以确定钢材质量对许多工业应用都至关重要。与人工评级相比，自动 NMI 评级解决方案具有明显优势，可实现高效、经济的钢材质量评估。使用光学显微镜和先进的软件，自动 NMI 评级可为多个完整样品提供可靠、一致的结果，且不受用户影响。徕卡显微系统公司的钢材质量解决方案套件就是自动 NMI 评级解决方案的一个例子，它可以帮助钢铁生产商和零部件制造商节省时间和金钱。

消翳现真—突破传统宽场成像的极限

许多软件包都包含成像优化算法，通过降低背景噪声来增强图像特征的对比度。从 WF 图像中去除背景噪声最常用的方法是滚动球和滑动抛物面。近期徕卡显微系统公司推出了其自主研发的成像优化技术—即时成像解析(ICC)，该技术已集成于所有徕卡THUNDER宽场成像平台。

钢材质量评估过程中人工评级非金属夹杂物（NMI）的挑战

快速、精确和可靠的非金属夹杂物（NMI）评级对钢材质量评估具有重要作用。在钢铁生产和组件制造过程中，非金属夹杂物（NMI）人工评级是一种常用的方法.

Fluorescence microscopy image on the left with no distinction between the fluorescent signal and background autofluorescence. FLIM was used in the image on the right to differentiate autofluorescence in chloroplasts (blue) from the desired fluorescent signal from the cell membrane (green).

学习如何从共聚焦图像中去除自发荧光

了解自发荧光的常见原因以及如何将其从共聚焦显微镜图像中去除。根据应用的不同，自发荧光的来源可能有很多种，但幸运的是，同样也有很多的解决方案--从更换介质到使用荧光寿命成像和近红外染料。

通过光遗传和电刺激技术研究纳米桥接结构和动力学

纳米级超微结构信息通常是由经固定和处理样品的静态图像获得的。但是，这些静态图像只是不断变化的动态结构中的一个瞬间。因此，如何探索动态过程中的特定时间点，是纳米级超微结构研究的一个重大挑战。通过光遗传或电刺激技术，并结合毫秒级样品玻璃化技术探索纳米级超微结构，是一种解决上述问题具有前景的技术。在本应用白皮书的第一部分中，我们将从实际应用角度讨论光刺激辅助的样品玻璃化工作流程。

清晰对比、无雾的 3D 样本实时图像

历史上，宽场显微镜并不适合对大样本/标本体积进行成像。图像背景（BG）主要来源于观察样本的失焦区域，显著降低了成像系统的对比度、有效动态范围和最大可能的信噪比（SNR）。记录的图像显示出典型的雾霭，并且在许多情况下，无法提供进一步分析所需的细节水平。处理厚三维样本的研究人员要么使用替代显微镜方法，要么尝试通过后处理一系列图像来减少雾霭。