显微镜知识库

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徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记,你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区,分享您的专业知识!

超薄切片介绍

对样本开展研究时,为了以纳米级分辨率显示其精细结构,通常会使用到电子显微镜。电子显微镜有两种类型:扫描电子显微镜(SEM)用于对样本表面成像,以及需要使用极薄电子透明样本的透射电子显微镜(TEM)。因此,使用电子显微镜对样本内部的精细结构进行成像时,此类技术解决方案需要制作出非常薄的样本切片。被称为超显微技术的样本制备方法可以产生具有最小伪影的超薄切片(厚度20-150nm)。在切片过程中,样本的…
Developing embryos of different species at different stages during the elongation of their posterior body axis, from left to right in developmental time. The labelled regions in red depict a region of undifferentiated cells called the tailbud, with the corresponding region generated from that tissue shaded in grey. Upper row: lamprey; middle row: catshark; bottom row, zebrafish. This figure has been adapted from the following publication: Steventon, B., Duarte, F., Lagadec, R., Mazan, S., Nicolas, J.-F., & Hirsinger, E. (2016). Species tailoured contribution of volumetric growth and tissue convergence to posterior body elongation in vertebrates. Development, 2016. 143(10):1732-41

如何研究胚胎发育过程中的基因调控网络

请与 Andrea Boni 博士一起参加本次点播网络研讨会,探索光片显微镜如何彻底改变发育生物学。这种先进的成像技术可对三维样本进行高速、容积式实时成像,且光毒性极低。通过用户实例了解光片显微镜如何增强我们对肠道和大脑类器官发育的理解,并深入了解徕卡显微系统公司的 Viventis Deep 显微镜背后的技术及其在长期成像中的应用。
Mouse brain (left) microdissected with a 10x objective (upper right). Inspection of the collection device (lower right).

激光微切割(LMD)促进的分子生物学分析

使用激光微切割(LMD)提取生物分子、蛋白质、核酸、脂质和染色体,以及提取和操作细胞和组织,可以深入了解基因和蛋白质的功能。它在神经生物学、免疫学、发育生物学、细胞生物学和法医学等多个领域有广泛应用,例如癌症和疾病研究、基因改造、分子病理学和生物学。LMD 也有助于研究蛋白质功能、分子机制及其在转导途径中的相互作用。
Image of murine dopaminergic neurons which have been marked for laser microdissection (LMD).

利用激光显微切割(LMD)在空间背景下分离神经元

在阿尔茨海默病之后,帕金森病是第二常见的进行性神经退行性疾病。在首发症状出现之前,中脑中高达70%的多巴胺释放神经元已经死亡。本文描述了如何使用现代激光显微切割(LMD)方法帮助解决帕金森病之谜。研究涉及在空间背景下分离和分析神经元。这些细胞来自帕金森病患者的死后黑质组织样本,以便深入了解该病的分子机制。

激光显微切割技术用于组织和细胞分离的协议 - 免费下载电子书

激光显微切割(LMD,也称为激光捕获显微切割或LCM)使用户能够分离特定的单个细胞或整个组织区域,甚至亚细胞结构如染色体。纯化的组织和细胞可用于下游的RNA、DNA和蛋白质组工作流程。
The role of extracellular signalling mechanisms in the correct development of the human brain

在神经发育过程中,细胞是如何相互交流的?

细胞间通信是大脑发育过程中一个必不可少的过程,它受到多种因素的影响,包括细胞的形态、粘附分子、局部细胞外基质和分泌囊泡。在本次网络研讨会上,您将了解到对这些机制更深入的理解是如何推动对神经发育障碍的理解的。
In vivo imaging of a mouse pial and cortical vasculature through a glass window (ROSAmT/mG::Pdgfb-CreERT2 mouse meningeal and cortical visualization following tamoxifen induction and craniotomy). Courtesy: Thomas Mathivet, PhD

神经血管病理学之窗

探索先天性免疫如何在神经血管病变后持续产生有害影响,以及能够对这些事件进行纵向研究的技术发展。
Mouse cortical neurons. Transgenic GFP (green). Image courtesy of Prof. Hui Guo, School of Life Sciences, Central South University, China

显微镜如何帮助研究机械感受和突触通路

Tobi Langenhan教授使用显微镜研究突触蛋白质组合体,研究粘附性GPCR的机械感受特性,并了解蛋白质动力学及其空间相互作用。
THY1-EGFP labeled neurons in mouse brain processed using the PEGASOS 2 tissue clearing method, imaged on a Leica confocal microscope. Neurons were traced using Aivia’s 3D Neuron Analysis – FL recipe. Image credit: Hu Zhao, Chinese Institute for Brain Research.

借助人工智能,揭示复杂而密集的神经元图像中的洞察

神经元的3D形态学分析通常需要使用不同的成像模式,捕捉多种类型的神经元,并在各种密度下相连的传统Leica SP8显微镜采集多达解神经元的形态,这对许多研究人员来说仍然是一个耗时的挑战。
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