Leica Microsystems: 显微镜科学与教学知识中心

显微镜科学与教学知识中心

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍

冷冻断裂是一种将冰冻样本劈裂以露出其内部结构的技术。冷冻蚀刻是指让样本表面的冰在真空中升华，以便露出原本无法观察到的断裂面细节。金属/碳复合镀膜能够实现样本在SEM（块面）或TEM（复型）中的成像，主要用于研究如细胞器、细胞膜，细胞层和乳胶。这项技术传统上用于生物学应用，但现在逐渐在物理学和材料科学中展现出重要意义。近年来，研究人员通过冷冻断裂电子显微镜，尤其是冷冻复型免疫标记（FRIL），对膜蛋…

样本修块简介

使用超薄切片机制作样本超薄切片前需要预制样本。在预制过程中，必须特别留意样本尺寸（切片尺寸）、样本位置（目标定位）和块面边缘精准度。这个过程通常叫做修块，在此过程中样本大多被修块成金字塔截头锥体的形状。

[Translate to chinese:] Alexander von Inostranzeff (1843–1919)

比对显微镜 125 年的发展历程

要科学准确地对两个物体进行光学比较，必须能够同时观察它们。特别是在比较只能借助光学放大系统才能观察到的微小物体时，更是如此。如果你只有一台显微镜，而且必须交替观察两个物体，那么你就需要有出色的记忆力，而且永远不能排除判断错误的风险，尤其是在检查结构、颜色或轮廓只有细微差别的物体时。这种认识促使圣彼得堡的地质学教授亚历山大-冯-伊诺斯特兰泽夫（Alexander von…

冷冻替代的简要介绍

冷冻替代是一种在足够低温的条件下进行的脱水过程，以避免形成冰晶，并有效规避在环境温度下脱水后观察到的破坏性影响。在冷冻替代期间，“冷冻”水被有机溶剂溶解，有机溶剂通常也含有化学固定剂。冷冻替代与细胞成分的即刻物理固定（冷冻固定）以及树脂包埋相关联。一旦替代完成，样品会逐渐升温，并与常规制备的样品一样进行进一步处理。与化学固定技术相比，成功的冷冻固定及后续FS处理显示出优良的精细结构保存[2]。即使…

[Translate to chinese:] Acousto-optics, sketch

声光调制在全光谱型激光共聚焦显微镜系统的应用

荧光最显著的特征是照射光（激发光）和检测光（发射光）颜色之间的偏移，称为斯托克斯位移。因此，在荧光成像中，不仅要将激发光和发射光的相应波长过滤出来，还需要将激发光从发射光中分离。过去，通常用平面光学元件，包括灰色或彩色滤光片和反射镜进行滤光和分光。虽然有多种平面光学元件可供使用，但固定的规格和低切换效率使其在使用上具有局限性，并且采用不同角度或梯度的涂层作为激发光和发射光的调谐方法也被证实并不可行…

EM样本制备中对比显影的简要介绍

由于电子显微镜中的对比显影主要取决于细胞中有机分子的电子密度差，因此染色效率需取决于附着在生物结构上的染色剂的原子量。所以在电子显微镜中使用最广泛的染色剂是重金属铀和铅。尽管单独使用其中一种染色剂对于常规用途来说较为实用，但依次使用这两种染色剂（醋酸铀UA和柠檬酸铅的“双重染色”）则可以获得最高的对比度。

玻璃制刀机介绍——用于电子显微镜和光学显微镜

超薄切片机需要使用玻璃刀，为电镜和光镜提供超薄样本切片。对于树脂切片和冷冻切片（Tokuyasu样本）的玻璃刀，其刀锋必须非常锋利、坚固、稳定。采用断裂法制备优质玻璃刀时，玻璃条的质量非常重要。玻璃条由精选玻璃生产而成，厚度和质量均经过精确把控。只有采用高质量标准来严格把控公差，才能从一块玻璃中制出两把优质玻璃刀。

电子显微镜镀膜技术简要介绍

电子显微镜领域需要对样本进行镀膜处理才能改善样本的成像效果。在样本上形成一层金属导电层可抑制电荷聚积、减少热损伤，并改善SEM对样品拓扑结构检测所需的二次电子信号量。在x射线显微分析中，网格上支持膜，TEM观察复型样品中的背底支撑膜，涉及既对电子束透明但同时具备导电效果的精细碳膜。具体需要采用的镀膜技术取决于分辨率和应用。

电子显微镜碳厚度

在电子显微镜样品镀膜时，石英晶振片可控制镀膜的厚度。这些晶振片一定的频率（新晶体时约为6兆赫）进行振荡。通过测量镀膜前和镀膜后的频率、镀膜材质比重和石英的几何位置，可以计算出应用厚度。