活细胞成像

使用现在已开发的各种荧光蛋白和多色探针几乎可以标记任何分子。对囊泡、细胞器、细胞和组织中的蛋白质动力学成像的能力为了解细胞在健康和疾病状态下如何工作提供了新的洞察力。这些包括有丝分裂、胚胎发育和细胞骨架变化等过程的时空动态。

研究活细胞时，常见的障碍包括光毒性和光损伤。要捕捉快速的生物过程，关键是保持细胞健康并获得清晰的图像，确保数据可靠、无伪影。活‐细胞显微成像通常需要在图像质量与细胞健康之间作出取舍。在成像过程中必须保持特定的环境条件，以免细胞发生变化。

各种高性能的徕卡成像解决方案可以克服活细胞成像的这些挑战，有助发现细胞生理学和动力学方面的新信息。

我们的活细胞成像应用解决方案专家将竭诚为您提供建议.

您的活细胞成像需求

要想成功地进行活细胞成像实验，使用合适的平台至关重要。在选择用于活细胞成像的光学显微镜时，应考虑以下 3 个变量：检测器灵敏度（信噪比）、样本活性和图像采集速度。适合活细胞应用的方法能够在不损伤细胞的情况下对动态事件成像，因为细胞损伤会影响结果。活细胞成像主要使用荧光显微镜进行。

Visualization of brain organoids with a THUNDER Imager Live Cell – Nucleus (DAPI), p-vimentin (AF488), DCX (AF568), PAX6 (AF647). Uncleared human brain organoid (4 colors); Image courtesy by Atria Kavyanifar, M.Sc. (supervised by Prof. Dr. Lie, Prof. Dr. Winner) University Clinic Erlangen, Germany).

Mica。观察样本所需的一切都集中在一个易于使用的系统中。同时 4 色宽场，共聚焦分辨率，通过人工智能支持分析。

徕卡显微系统的 THUNDER 成像系统、一款 Microhub 的 Mica、STELLARIS 共聚焦平台和 FLIM 提供了最新的宽场和共聚焦成像创新技术，可快速进行 3D 活细胞成像。

宽场显微镜可灵活激发和快速采集，通常用于对细胞动态和发育进行长时间成像。共聚焦显微镜通常用于研究亚细胞动态事件。多光子显微镜可使用较长波长的光激发，可减少光漂白并延长细胞活性。最后，荧光寿命成像 (FLIM) 可用于研究细胞中的快速动态信号事件。

徕卡DMi8倒置显微镜 DMi8 S 高速成像平台

模块化的 DMi8 倒置显微镜是 DMi8 S 平台的核心。DMi8 S 平台是适用于日常活细胞研究的完整解决方案。不管是精确跟踪培养皿中单个细胞的发育，筛选多个分析，获取单分子级的清晰度，还是梳理复杂过程的行为，DMi8 S 系统都能让您看得更多、看得更快，让您发现隐藏的信息。

成像过程中的细胞活性和动力学

徕卡显微系统为您提供活细胞成像方面的智能创新。我们的解决方案可帮助您获得最佳的图像质量，同时保护好您的样本。大多数细胞过程在三维空间中随着时间的推移进行。因此，若要掌握全面的情况，必须以四个维度（XYZ 和时间）对细胞成像。延时成像方法可捕捉从几秒到几个月内的细胞事件。也可以在特定时间点对细胞重复成像。为了在这个过程中保护细胞活性，活细胞成像时需要温度、酸碱度和湿度都受到控制。曝光量也应在最低限度，以免发生光毒性。

徕卡显微系统提供的成像解决方案有助于优化您对活细胞的研究，即使是长时间的研究也同样如此。它们能提供必要的图像对比度和分辨率，有助动态事件的分析。有些徕卡系统还可以实现高速成像，可以避免相同时间点的标签之间发生时空失配，因此不会错过任何关键的细胞事件。

Fast 3D in vivo imaging of Nematostella vectensis (Cnidaria) showing endogenous signal for cilia, nematosomes and clusters of freely circulating cnidocytes (green) and dextran red fluorescence (magenta). Endogenous signals and fluorescence separated by TauGating on HyD S, 340 volumes acquired in 12 min 45 s. Scale bar, 50 μm. Sample courtesy of Anniek Stokkerman and Aissam Ikmi, EMBL Heidelberg.

活细胞温和成像

使用STELLARIS，您不必再为了获得出色的图像而损伤样本健康。无论您是需要很长的采集时间进行高分辨率的3D图像重构，还是需要高帧频来捕捉高速动态事件，我们的高效信号探测技术可确保您在防止样本受到光漂白和光毒性影响的前提下完成所需要的实验。

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作为徕卡显微系统有限公司的信息门户，ScienceLab (徕卡课堂) 提供许多关于显微技术主题的科研和教学材料。其内容宗旨在于为初学者、有经验的从业者和科学家等的日常工作和实验提供支持。

Two-color caspase assay with tile scan. U2OS cells were treated with the nuclear marker DRAQ5 (magenta) and CellEvent™ (yellow).

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用于研究细胞凋亡或程序性细胞死亡的市售试剂盒用于测量化学品或潜力新药的毒性。本期MicaCam中，我们将呈现如何通过在细胞凋亡试剂盒添加额外标记物，显著增加研究人员从同一实验中获得的信息量。在延时成像期间同时捕捉所有标记物，可以对星形孢菌素诱导细胞死亡过程中多个事件的精确顺序进行定量分析。

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复杂3D数据集——人工智能赋能的空间数据分析

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[Translate to chinese:] Zebrafish heart showing the ventricle with an injury in the lower area

斑马鱼心脏损伤后心肌细胞增殖现象

本期MicaCam聚焦于斑马鱼相关研究（斑马鱼）。不同于其他哺乳动物的心脏细胞，斑马鱼的心脏细胞能够在受损之后完全再生。

细胞骨架如何运输分子？

MicaCam是生命科学研究人员聚集在一起现场聊天、互动沟通和探索发现的地方。欢迎您在直播中分享问题，参与互动。

[Translate to chinese:] Developing zebrafish (Danio rerio) embryo, from sphere stage to somite stages.

研究斑马鱼胚胎的早期发育阶段

第2集MicaCam的内容是结合宽场和共聚焦成像来研究斑马鱼胚胎（Danio rerio）的早期发育阶段，即从卵细胞到多细胞阶段。

U2OS cells stained with Hoechst for nuclei (blue), MitoTracker green (Mitochondria structure, green) and TMRE (active mitochondria, magenta) and SiR for tubulin (red). Simultaneous acquisition of four channel large area overview using Spiral scan feature using the 10x/1.20 CS2 Water MotCORR objective.

如何获得具有完全时空相关性的多标记实验数据

首期MicaCam会聚焦于活细胞实验当中的挑战。我们的主持人Lynne Turnbull和Oliver Schlicker将以活细胞内线粒体活动研究为例，手把手为您展示如何用多孔板培养箱设计您的实验，以及如何分析结果。

[Translate to chinese:] Dual color volume rendering of Drp1 oligomers (green) and mito OM (red) in a live U2OS cell

多色四维超分辨光片显微镜

人工智能显微术研讨会主要关注和讨论显微术和生物医学成像领域的最新人工智能技术和工具。在该科学演示中，Yuxuan Zhao展示了如何通过渐进式深度学习策略并结合“双环调制的SPIM”设计改善活细胞中的细胞器三维成像。

如何为免疫荧光显微镜制备样本

免疫荧光（IF）是一种用于可视化观察细胞内过程、状态和结构的强大工具。IF制剂可通过多种显微镜技术（如激光共聚焦、宽场荧光、全内反射成像等）来加以分析，具体取决于应用目的或研究人员的关注重点。与此同时，在很多使用至少一套简易荧光显微镜的研究工作组当中，IF早已成为不可缺少的一部分。

荧光活细胞成像技术

理解复杂和/或快速的细胞动力学是探索生物过程的重要一步。因此，如今的生命科学研究越来越关注动态过程，例如细胞迁移，细胞、器官或整个动物的形态变化，以及活体样本中的实时生理事件（如细胞内离子成分的变化）。满足此类高难度需求的一种方法是采用某些统称为活细胞成像的光学方法。

关于活细胞成像

除了细胞或器官的结构组织，细胞动态过程是一个功能生物实体的主要贡献者。当然，这些过程可以在活细胞中通过非侵入性技术如光学方法观察到，统称为“活细胞成像”方法。活细胞成像涵盖了所有用显微镜观察活细胞的技术——从用体视显微镜观察胚胎发生，到用复合显微镜研究细胞生长，直到用荧光染料或荧光蛋白研究细胞的生理状态或细胞运输。尽管对实验人员和设备(如成像系统，温度、CO2浓度控制)都要求很高，但活细胞成像技术提供的结果是当今研究不可或缺的。

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