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显微镜科学与教学知识中心

徕卡显微系统的知识库提供有关显微镜学科的科学研究和教学材料。内容旨在对显微镜初学者、有经验的显微镜操作实践者和使用显微镜的科学家在他们的日常工作和实验有所帮助。这里有探索交互式教程和应用笔记，你可以找到你需要的显微镜的基础知识以及前沿技术——快来加入徕卡显微知识社区，分享您的专业知识！

光学显微镜 – 基础入门

150多年来，光学显微镜一直都是生命科学研究以及材料科学当中的标准工具之一。要经济有效地使用这一工具，了解光学的基础知识，尤其是构成每一台显微镜的基本组成部分将会获得很大的帮助。

冷发光基础原理

自然界中有许多发光过程。冷发光是一系列发光现象的统称，是指不因高温而引发的发光事件。本文描述了不同形式的冷光并对荧光进行了详细介绍。在第二部分解释了描述荧光色素的相关技术术语，如淬灭、漂白或量子效率，以便对荧光分子的基础特性有更深入的了解。

荧光入门介绍

荧光是George Gabriel Stokes于1852年首次报道的一种现象。他观察到萤石在紫外线照射后开始发光。荧光是光致发光的一种形式，是指一种材料被光照射后会发射出光子。发射光的波长比激发光更长。这种效应又称为斯托克斯位移。

Section taste buds rabbit, differential interference contrast microscope

Optical Contrast Methods

Optical contrast methods give the potential to easily examine living and colorless specimens. Different microscopic techniques aim to change phase shifts caused by the interaction of light with the…

[Translate to chinese:] Modulation contrast visualizes transparent, low-contrast specimens.

集成调制对比度 (IMC)

霍夫曼调制对比已成为观察未染色、低对比生物标本的标准。其创新的技术实现大大简化了操作，提高了使用的灵活性。将调制器集成到现代倒置显微镜的光束路径中，就可以使用各种明视野或相位物镜，而无需选择少量专用物镜。

[Translate to chinese:] Tartaric acids, polarization

偏振光显微观察

偏光显微镜通常应用于材料科学和地质学领域，根据矿物的折射特性和颜色来识别矿物。在生物学中，偏光显微镜通常用于晶体等双折射结构的识别或成像，或用于植物细胞壁中纤维素和淀粉粒的成像。

[Translate to chinese:] Transgenic Mouse Embryo, GFP

显微镜中的荧光

荧光显微技术是一种特殊的光学显微镜技术。它利用的是荧光色素在一定波长的光激发下发光的能力。通过抗体染色或荧光蛋白标记，可以用这种荧光色素标记感兴趣的蛋白质。这样就可以确定单分子物种的分布、数量及其在细胞内的定位。此外，还可以进行共定位和相互作用研究，使用可逆结合染料（如 Ca2+ 和 fura-2）观察离子浓度，以及观察细胞的内吞和外吞过程。如今，利用荧光显微镜甚至可以对亚分辨率颗粒进行成像。

Object planes of the Greenough stereomicroscope with depth of field range.

如何形成清晰的图像

在显微镜检查中，景深常被看做经验参数。在实际操作中，会根据数值孔径、分辨率和放大率之间的相关性确定该参数。为了获得最佳视觉效果，现代显微镜的调节设备在景深和分辨率之间实现了最佳平衡，这两个参数在理论上呈负相关。

当心“无效”放大率

在一个最简化的情况，光学显微镜由一个靠近标本的透镜（物镜）和一个靠近眼睛的透镜（目镜）组成。显微镜放大率是两个显微镜透镜系数的乘积。比如，40倍物镜和10倍目镜可以得到400倍放大率。