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全内反射荧光显微镜(total internal reflection fluorescent microscope,TIRFM)在生命科学研究中的应用
全内反射荧光显微镜的独特之处在于利用衰逝波激发荧光团。与传统的弧光灯、LED 或激光宽场荧光照明方式不同,衰逝波仅能从盖玻片/介质界面开始穿透样本约 100 纳米深度。
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超分辨率 GSDIM 显微镜
纳米级技术GSDIM(基态耗尽显微镜后单分子返回)提供了细胞内蛋白质和其他生物分子空间排列的详细图像。目前市场上已有首个商业系统(Leica SR GSD),它正在帮助将GSDIM技术推广给更多研究实验室和成像中心的用户。
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集成调制对比度 (IMC)
霍夫曼调制对比已成为观察未染色、低对比生物标本的标准。其创新的技术实现大大简化了操作,提高了使用的灵活性。将调制器集成到现代倒置显微镜的光束路径中,就可以使用各种明视野或相位物镜,而无需选择少量专用物镜。
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显微镜中的荧光
荧光显微技术是一种特殊的光学显微镜技术。它利用的是荧光色素在一定波长的光激发下发光的能力。通过抗体染色或荧光蛋白标记,可以用这种荧光色素标记感兴趣的蛋白质。这样就可以确定单分子物种的分布、数量及其在细胞内的定位。此外,还可以进行共定位和相互作用研究,使用可逆结合染料(如 Ca2+ 和 fura-2)观察离子浓度,以及观察细胞的内吞和外吞过程。如今,利用荧光显微镜甚至可以对亚分辨率颗粒进行成像。