EM ICE 多功能高压冷冻平台

玻璃化处理助力深度解析

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3D rendering of a mouse beta cell with mitochondria (blue), insulin SGs (orange), microtubules (red), nucleus (yellow), and plasma membrane (transparent).

High-Pressure Freezing Protocols for Ultrastructural 3D EM

High pressure freezing (HPF) can help preserve hydrated cells and tissues close to their biological state at the moment of immobilization, supporting more reliable ultrastructural interpretation than…
Foraminifera (Ammonia confertitesta) labeled with membrane-permeable calcein, high-pressure frozen in salt water using EM ICE. The sample was cryo-planed and targeted with the M205 on the Cryo-Fluo Enuity, then transferred under cryo conditions to the Cryo-Stellaris for widefield and confocal imaging, revealing details of the staining pattern. Image courtesy: David Evans, University of Southampton.

High-Pressure Freezing for Organoids: Cryo CLEM & FIB Lift Out

Master cryo EM workflow steps for challenging 3D samples: when to choose HPF vs. plunge freezing, reproducible blotting/ice control, contamination aware transfers, Cryo CLEM 3D targeting in organoids,…
Electron microscope (EM) image of a cross section of C. elegans (roundworm). Courtesy of T. Müller-Reichert, MPI-CBG, Dresden, Germany and K. McDonald, University of California, Berkeley, USA.

高压冷冻简介

水是细胞最主要的组成部分,因此对于维持细胞超微结构至关重要。目前,冷冻固定是固定细胞成分,而不导致其显著结构变化的唯一途径。现阶段有两种常见的方法:投入冷冻与高压冷冻固定。
用 GFAP-A647 进行免疫染色并使用THUNDER成像仪组织成像的小鼠脑片。美国费城宾夕法尼亚大学 H. Xu 提供。

神经科学研究指南

神经科学通常需要研究具有挑战性的标本,以更好地了解神经系统和疾病。徕卡显微镜帮助神经科学家深入了解神经元功能。
使用 "Waffle方法 "进行 HPF 制备后,载网上的小鼠海马脑切片。

"Waffle方法":使用高压冷冻制备复杂样品

本文介绍了一种特殊的高压冷冻方法,即 "Waffle 方法 "的优点。了解 "Waffle 方法 "如何使用电镜载网作为高压冷冻的载体,从而减少样本厚度并支持复杂生物样本的高效低温电子显微镜工作流程。此外,本文还强调了现代 HPF 系统-徕卡微系统公司 EM ICE 的优势,并列举了 EM ICE 用于 "Waffle方法 "的参考文献。
Micrograph of dinoflagellate cells. Scale bar = 1 µm.

高压冷冻技术如何提升海洋微生物分析效果

在本应用示例中,我们展示了高压冷冻、冷冻替代及超薄切片技术在海洋生物学领域的应用,重点针对甲藻的超微结构分析。EM ICE 设备的便携性使得样本采集后可直接在海洋站进行高压冷冻处理。

如何成功进行活细胞光电关联

Coral Life 提供了简化的活细胞 CLEM 解决方案,用于深入了解细胞成分随时间发生的结构变化。除了工作流程手册中描述的技术处理外,本文还提供了成功进行实验的其他知识。
HeLa Kyoto cells (HKF1, H2B-mCherry, alpha Tubulin, mEGFP). Left image: Maximum projection of a z-stack prior to ICC and LVCC. Right image: Maximum projection of a mosaic z-stack after ICC and LVCC.

如何使用Coral Life(活细胞光电联用)改进活细胞成像

对于活细胞 CLEM 应用而言,光学显微镜成像是在正确的时间以正确的状态识别正确细胞的关键步骤。在本文中,徕卡专家就使用宽场系统的优势以及使用蓝宝石作为细胞培养基底时需要克服的障碍分享了他们的见解。
The EM ICE Nano loading area

如何让样品保持在生理状态

Coral Life工作流将动态数据与最佳的样品固定方式(高压冷冻)相结合。然而,如果您的细胞因为温度下降,或缺氧气、二氧化碳或营养物质缺乏而受到损伤,那么再好的样品保存也没有意义。这些因素将影响一系列的生物过程,甚至破坏原超微结构基础,影响您的分析。

将动态活细胞数据融入超微结构

采用徕卡Nano的工作流程,可以避免过去如海底捞针似的寻找。利用光电关联显微技术,在适当的时间直接鉴别出正确的细胞,并将动态的活细胞数据融入其超微结构中。

高压冷冻仪实现快速高质量的玻璃化冷冻

高压冷冻仪采用独特的冷冻原理,仅使用单一加压冷却介质——液氮(LN)。该设计带来三大优势,确保样品玻璃化冷冻的高质量结果。

使用增强功能电子显微镜研究大脑切片中的突触

神经科学的一个基本问题就是突触的结构与其功能特性之间有何关系?过去几十年,电生理学揭示了突触传递机制,而电子显微镜(EM)深入探索了突触形态。用于关联突触生理学和超微结构的方法可以追溯到20世纪中叶。目标是获得突触传递的快照,即捕获电子显微照片中的动态过程。

高压冷冻技术:揭示突触传递的功能机制

深入了解如何在 EM ICE 中应用光遗传学刺激技术,以及该技术如何有望揭示突触传递的结构与功能机制。获取关于如何将光遗传学刺激应用于小鼠急性脑切片和器官型脑切片培养物中完整神经网络的详细介绍。

冷冻电子显微镜的工作流程与仪器配置

冷冻电子显微镜作为一种日益流行的研究大分子复合体结构的模态,已在细胞生物学领域促成了众多新见解。近年来,该技术进一步向原位结构生物学方向拓展,成为解析自然状态下结构的首选技术。同样,冷冻断裂与冷冻扫描电子显微镜(SEM)的应用也日益广泛。

模式生物研究

模式生物是研究人员用来研究特定生物学过程的物种。 它们具有与人类相似的遗传特征,通常用于遗传学、发育生物学和神经科学等研究领域。 选择模式生物的原因通常是它们在实验室环境中易于保持和繁殖、生成周期短,或能够产生突变体来研究某些性状或疾病。

病毒学

您的主要研究对象是病毒感染和疾病吗? 了解如何使用徕卡显微系统公司的成像和样本制备解决方案深入研究病毒学。
Roland A. Fleck

专家在低温扫描电镜工作流程高压冷冻和冷冻断裂方面的知识

深入了解实验室工作方法并了解在EM样本制备过程中低温扫描电镜研究的优势。了解如何将高压冷冻、冷冻断裂和冷冻传送添加到低温扫描电镜工作流程中,以及徕卡组合如何确保这些不同步骤之间的兼容性。

通过光遗传和电刺激技术研究纳米桥接结构和动力学

纳米级超微结构信息通常是由经固定和处理样品的静态图像获得的。但是,这些静态图像只是不断变化的动态结构中的一个瞬间。因此,如何探索动态过程中的特定时间点,是纳米级超微结构研究的一个重大挑战。通过光遗传或电刺激技术,并结合毫秒级样品玻璃化技术探索纳米级超微结构,是一种解决上述问题具有前景的技术。在本应用白皮书的第一部分中,我们将从实际应用角度讨论光刺激辅助的样品玻璃化工作流程。
Gold EM grid with a silicon dioxide (SiO₂) support film, containing vitrified T47D cells intrinsically expressing GFP-H2B (labeling nuclei) and RFP-LifeAct (labeling the actin cytoskeleton) and high-pressure frozen C. elegans germline tissue, fluorescently labeled with GFP-tagged synaptonemal complex protein

电子显微镜样品制备工作流程& 用途

通过使用徕卡样品制备解决方案,研究人员可以在利用电子显微镜对样品进行成像时,始终获得高质量、精确且可重复的结果。我们的解决方案支持扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)及冷冻电镜(Cryo EM)。

应用领域

光电关联显微技术 (CLEM)

徕卡显微系统的Coral工作流程帮助用户将荧光和电子显微成像(CLEM)数据相关联。

电子显微镜样品制备工作流程& 用途

通过使用徕卡样品制备解决方案,研究人员可以在利用电子显微镜对样品进行成像时,始终获得高质量、精确且可重复的结果。我们的解决方案支持扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)及冷冻电镜(Cryo EM)。
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