比例成像
细胞的许多基本功能在很大程度上依赖于离子(例如钙、镁)、电压势和细胞质与周围细胞外空间之间的 pH 值的微妙但动态的平衡。这些平衡的变化会显著改变细胞的行为和功能。因此,实时测量细胞内离子、电压和 pH…
荧光寿命成像与荧光共振能量转移
荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。
FLIM将寿命测量与成像相结合:对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码,产生额外的图像反差。因此,FLIM可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。…
消除激光显微切割中的静电干扰
激光显微切割(LMD)中的静电荷会导致两种严重问题:样品粘附在带电表面而丢失,或者样品飞入相邻的孔中造成交叉污染。我们在 Leica LMD7 环境室中集成了一个离子发生器除静电。离子发生器将静电位移从 16%(16/100 次切割)降低到 0.2%(1/450+ 次切割)。低吸附 384 孔板的收集率从 65-75% 提高到 85-95%。
荧光染料应用和特性概述
本文将介绍常用的荧光染料并概述其特性。荧光显微镜借助荧光染料、荧光蛋白或使用抗体的免疫荧光染色来研究特定的细胞成分。由于荧光剂种类繁多,荧光显微镜可用于检查蛋白质、核酸、聚糖、细胞器和其他细胞结构。
显微镜中的荧光
荧光显微技术是一种特殊的光学显微镜技术。它利用的是荧光色素在一定波长的光激发下发光的能力。通过抗体染色或荧光蛋白标记,可以用这种荧光色素标记感兴趣的蛋白质。这样就可以确定单分子物种的分布、数量及其在细胞内的定位。此外,还可以进行共定位和相互作用研究,使用可逆结合染料(如 Ca2+ 和 fura-2)观察离子浓度,以及观察细胞的内吞和外吞过程。如今,利用荧光显微镜甚至可以对亚分辨率颗粒进行成像。
活细胞成像指南
在生命科学各研究领域的广泛应用中,活细胞成像是一种不可或缺的工具,用于观察细胞在尽可能接近活体(即活的、活跃的)状态下的情况。本指南回顾了确保成功进行活细胞成像的各种重要注意事项,并介绍了各种旨在克服常见挑战的高性能解决方案。这些进展使我们能够对细胞生理学和动力学有新的认识。
选择研究用显微镜时应考虑的因素
光学显微镜通常是生命科学研究实验室的核心设备之一。它可用于各种应用,揭示许多科学问题。因此,显微镜的配置和功能对其应用范围至关重要,从明视野显微镜到荧光显微镜,再到活细胞成像。本文简要概述了显微镜的相关功能,并总结了在选择研究用显微镜时应考虑的关键问题。
高压冷冻简介
水是细胞最主要的组成部分,因此对于维持细胞超微结构至关重要。目前,冷冻固定是固定细胞成分,而不导致其显著结构变化的唯一途径。现阶段有两种常见的方法:投入冷冻与高压冷冻固定。
无限远光学系统 - 从 "无限远光学 "到无限远端口
"无限远光学 "是指显微镜的物镜和管状透镜之间的光路具有平行光线的概念 [1]。在这个 "无限远空间 "中放置平面光学元件不会影响图像的形成,这对于科学应用中常用的 DIC 或荧光等对比方法至关重要。需要在无限远光路中添加光源或激光设备等仪器。本文介绍了满足这一需求的不同方法。