切刀片背后故事：Helmut Gnägi对聚合物超薄切片的专业见解-Diatome
Helmut Gnägi是世界上最值得信赖的金刚石切片刀公司之一的联合创始人，他花了几十年时间打磨超薄切片技术。我们与他坐在一起，从切片刀的几何形状到低温挑战，了解聚合物切片的微妙之处。
您是如何进入超薄切片领域的？
Helmut Gnägi： 我最初是一名机械工程师，但后来迷上了超薄切片技术。我们早期制造的都是手动抛光机，我看到了可以改进的地方。那时，像 Fernández-Morán这样的研究人员需要完美的大脑切片用于TEM观察。这一挑战成为我毕生的事业。
如今，人们为什么使用超薄切片技术，而不是FIB或低温等离子或其他技术？
Helmut Gnägi： 超薄切片仍然是获得高质量聚合物切片的最干净的方法。FIB和等离子方法会造成损伤--高温、离子和变形。而超薄切片则能保持材料的特性，特别是对于精细或多层聚合物。
重要见解：
超薄切片技术可提供无损伤、薄而光滑的切片，是TEM、AFM和表面敏感技术（如原子力显微镜）的理想之选。详见徕卡显微系统公司最新推出的超薄切片机UC Enuity。
室温和低温下聚合物切片的主要区别是什么？
Helmut Gnägi：在室温下，切片是漂浮的--你可以看到它们，也很容易拿起它们。而在低温下，情况就不同了。它们容易卷曲，更难处理。你需要技巧和合适的工具，比如用睫毛来压平或引导它们。
| 室温 | 低温 | |
|---|---|---|
| 刀槽 | 注水 | 通常干燥 |
| 切片状态 | 漂浮在水面上 | 容易卷曲 |
| 操作 | 更容易 | 需要工具（睫毛夹、镊子） |
| 修块 | 金刚石修块刀或修块机（EM RAPID） | 金刚石修块刀 |
| 包埋 | 可选项（环氧树脂、胶水或直接夹紧） | 小颗粒（颗粒、箔）时需包埋在OCT中 |
聚合物在切片前应如何固定？有什么技巧吗？
Helmut Gnägi： 正确的固定方式非常重要。如果样品弯曲，结构可能会发生变化。在进行超薄切片之前，应小心修剪聚苯乙烯等易碎聚合物。对于薄的聚合物薄膜，我一直建议使用凝胶超强胶将其夹在金属框架之间。对于精细的低温样品，OCT效果很好，但不要让它影响成像。
在聚合物切片时，人们最容易犯的错误是什么？
Helmut Gnägi： 他们用错了刀，或者刀已经不锋利了。并不是所有的金刚石切片刀性能都一样，尤其是在低温条件下。有些金刚石切片刀是为了切割包埋树脂而制造的，而不是进行干切。此外，修块也经常被省略或做得不好。
提示：始终根据切片条件（低温与常温）选择合适的刀具类型，并确保精确修块，以获得干净的切片条带。
对于聚合物切片新手，您最大的建议是什么？
Helmut Gnägi：了解您要切割的是什么，为什么要切割。是为了表面成像？内部结构？每种用途都需要不同的设置。而且要始终尊重切片刀--它不仅仅是工具，更是一种辅助工具。不了解应用，就无法制造出好的切片刀。
专家提示
- 避免弯曲坚硬的聚合物；扣住，而不要切断。
- 使用AFM样品夹和胶水夹来固定薄箔样品。
- 修块质量很重要，要使用适合低温和室温的切片刀。
- 在冷冻过程中，要准备好处理可能比较棘手的波浪状切片（准备好毛发、睫毛或粘在木棍上的达尔马提亚狗毛发）。
- 并不是所有的金刚石切片刀都是一样的，请向您的供应商询问干切实验的兼容性（直接联系 DIATOME 或通过您当地的 Leica 销售专家）。
