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如何创建EDOF(扩展景深)图像
观看此视频,了解如何使用徕卡显微系统LAS X软件的可选扩展景深(EDOF)功能,快速记录具有较大高度变化样本的清晰光学显微镜图像。以使用徕卡显微镜从低倍到高倍拍摄的电路板EDOF图像为例进行了展示。
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斑马鱼大脑高分辨率全器官成像
结构信息是理解复杂生物系统的关键,而脊椎动物的中枢神经系统是最复杂的生物结构之一。要想从发育中的斑马鱼身上分离出一个完整的大脑,我们需要覆盖大约10平方毫米的区域,深度在毫米范围内。通常,低倍透镜不能提供足够的分辨率来揭示神经组织中复杂结构之间的相互作用。此外,由于散射过程,使用共聚焦显微镜在致密生物组织内成像深度通常限制在大约10微米。
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利用光片显微镜改进三维细胞生物学工作流程
了解癌症发生过程中的亚细胞机制对于癌症治疗至关重要。常见的细胞模型涉及作为单层生长的癌细胞。然而,这种方法忽视了肿瘤细胞与其周围微环境之间的三维相互作用。为了贴近自然环境理解恶性肿瘤的发展和进程,对癌症微环境的详细表征至关重要。
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清晰对比、无雾的 3D 样本实时图像
历史上,宽场显微镜并不适合对大样本/标本体积进行成像。图像背景(BG)主要来源于观察样本的失焦区域,显著降低了成像系统的对比度、有效动态范围和最大可能的信噪比(SNR)。记录的图像显示出典型的雾霭,并且在许多情况下,无法提供进一步分析所需的细节水平。处理厚三维样本的研究人员要么使用替代显微镜方法,要么尝试通过后处理一系列图像来减少雾霭。
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工作流程与协议:如何使用徕卡激光显微切割系统和 Qiagen 试剂盒进行成功的 RNA 分析
激光显微切割(LMD)允许分离单个细胞或染色体,是一种在下游分析核酸内容(通过 PCR 或测序技术)之前进行样本准备的成熟技术。在这里,我们描述了徕卡LMD系统与 Qiagen 试剂盒成功结合的过程,即使在少量样本中也能有效提取核酸。所呈现的工作流程和协议为成功的LMD应用提供了基础,确保在过程中不损失核酸数量,并保持 RNA 的完整性,突显了产品的高质量。
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使用钙指示剂 Fura2 的宽场钙成像
在真核细胞中,Ca2+是信号转导通路中最广泛使用的第二信使之一。细胞内的 Ca2+ 水平通常保持较低,因为 Ca2+ 常常与磷酸化和羧酸化化合物形成不溶性复合物。通常,细胞质中的 Ca2+ 浓度在 100 nM 的范围内。作为对刺激的反应,Ca2+ 可以从外部介质或内部储存释放,以提高 Ca2+ 浓度。