激光显微切割耗材

然而，即使没有框架支撑件，框架载玻片也可用于装贴组织切片。

与有涂层加持的玻璃膜载玻片类似，带有PPS膜的框架载玻片几乎适用于任何应用场景。

采用POL膜的框架载玻片主要用于染色体显微切割（Post等人，MolEcoNotes，2006），需配合150倍空气干镜使用；而PET膜框架载玻片则特别适用于切割后进行质谱分析实验（Drummond 等人，Acta Neuropathol 2017）。与其他现有膜材相比，PET几乎不含增塑剂，而增塑剂可通过HPLC与蛋白质一同被纯化。此类增塑剂可能遮蔽部分质谱信号，导致某些谱带在受干扰区域无法显现。类似现象也会发生在收集过程中使用的PCR管。

特殊的FLUO膜尤其适合进行荧光成像、PH观察及真实微分干涉相差（DIC）模式观察。

载玻片框架亦可作为活细胞培养的样本载体使用。此时，矩形凹槽被当作培养皿。建议在此类培养过程中，将载玻片置于较大的培养皿内，待细胞接种至凹槽内的膜上后，用培养基完全覆盖。若使用PEN膜，培养细胞的形态不会改变；而其他类型的膜可能因表面特性差异导致培养细胞呈现不同形态。

对于难以附着在膜上的样本，可制作双框架载玻片夹层：只需将样本夹在两片框架膜之间，激光强度足以切割此类夹层结构。液滴或涂片样本同样适用于框架载玻片的激光显微切割操作。

针对植物样本及其他坚硬组织（如骨骼、牙齿等），推荐使用框架载玻片，因其对高功率激光的兼容性远优于普通玻璃载玻片。高功率激光可能导致玻璃表面烧焦，使得附着其上的材料更难以切割。

对于叶片等植物样本，完全无需使用膜载玻片作为载体，此类材料可直接用激光显微切割进行收集（Hölscher，《多酚研究新进展》(2019)）。

通过激光显微切割（LMD）后，样品在重力作用下落入收集容器中，例如标准的薄壁微量离心管及其管盖。不同载玻片与管盖的组合是激光显微切割中最常见的应用之一。通常使用标准的0.2毫升和0.5毫升离心管，管盖可以是空的（干燥）或填充有适当的缓冲液或类似合适介质。例如，管盖中含有RNase抑制剂的溶液可以防止核酸在激光显微切割过程后立即降解。同样，蛋白质可以通过缓冲液保持在稳定状态。空的干燥管盖为识别切割物提供了便利，并能通过拍摄前后照片轻松对比。基本上，显微切割物可以转移到任何标准管盖中。图 5a 和 5b 展示了与管盖和微量离心管匹配的收集器。尽管也可以使用特殊的收集材料 OptiCaps（#11505169），但对于徕卡激光显微切割系统而言，这些并非必需。OptiCaps集成了光学元件以确保最佳的照明均匀性，也可能具有“粘附”特性。然而，对于徕卡激光显微切割系统（Leica LMD）而言，无需使用昂贵的非标准管盖，因为其收集过程依靠重力驱动，无需克服重力作用。

此外，还提供带有硅胶填充盖的1.5毫升离心管。借助LMT350量子载物台上多通道收集器的杠杆装置，可将填充盖与膜上的组织接触。这种配置有助于收集具有挑战性的粘性样本。

系统还支持直接收集至特殊样本装置中，例如用于组织匀浆、蛋白质提取及压力循环技术（PCT, PressureBioSciences Inc.）消解的PCT微量管。直接收集至这些装置可节省时间，无需二次移液操作。 

徕卡独有的通用支架可适配同一载体中的多种收集装置，为不同应用场景提供多样化选择。此外，该支架高度可调，能将所选收集器贴近样本载体以最小化样本掉落距离。

8孔联排适用于大体积样本收集（如将活细胞收集到培养基中），8孔联排管盖是高通量应用的理想选择。此通用支架还可兼容腔室载玻片、多孔载玻片及LOC（实验室芯片）设备，例如：Ibidi®载玻片。所有装置均可作为激光显微切割的样本收集器。

8 孔联管 LCC

此类收集器的研发旨在提升后续活细胞分离检测的样本通量，可通过组合形成 96 孔板。图6a与6b分别展示了适配的8联管支架（LCC），这些支架可拼接成多孔板。多孔板是实施细胞培养高通量筛选的基础平台。

运用此类筛选技术，可在极短时间内分析海量单细胞培养物，并视需要进行再培养。

(适用于分子生物学/PCR)

0.2毫升8联管盖可作为激光显微切割的收集器。完成激光显微切割后，这些8联管盖可直接置于0.2毫升8联管或96孔PCR板上，以便直接放入PCR仪中进行后续操作（需提前申请）。实践证明，8联管盖特别适用于后续PCR、定量 PCR或其他需加热/冷却处理的实验流程，尤其适合大批量样本处理。

高度可调的48孔收集器（图8）支持同时放置六组8联管，使得单次实验即可轻松填充整块 96 孔板，极大提升了操作效率。

该通用支架同样适用于其他LOC设备，例如用于活细胞培养应用的18 孔Ibidi®载玻片和腔室载玻片（图9）。任何具有载玻片的x-y尺寸的自制收集装置，均可与此支架配合使用。

用于LCC模式的耗材

有多种样本载体适用于LCC（活细胞培养）中的激光切割、操作及筛选技术。徕卡提供为活细胞处理设计的LMD专用耗材：

• 培养皿（有含或不含PEN膜的版本可选）
• Ibidi®载玻片（有含或不含PEN膜可选）

这些带有PEN膜的耗材可作为切割样本载体，或即使不含PEN膜，也可作为活细胞激光操作的样本载体，同时还可作为再培养、克隆或下游分析的收集容器。

框架载玻片的矩形腔体同样适用于细胞培养（参见上文→框架载玻片）。

此外，培养皿以及带有PEN膜的 Ibidi®载玻片可与常用收集器兼容（0.5 毫升管、0.2毫升管、8孔联管、8联管盖、Ibidi载玻片、常规培养皿、多室培养载玻片及96孔板）。

培养皿通常适用于活细胞培养（LCC），可选 PEN膜或不带PEN膜版本。图10b展示了先前在图2a和2b中展示的适用于大型PEN/PPS载玻片和培养皿的样本固定器；此处已插入带有PEN膜的培养皿替代大型载玻片。图10c则演示了将培养皿用作收集器的场景。

(直径50毫米)

传统无PEN膜培养皿用于收集并重新培养显微切割物。此类培养皿虽不能用于激光显微切割的样本固定器，但适用于活细胞操作实验。通过延时摄影功能，可对选定区域进行LMD激光操作并实现长时程观察。

带PEN膜的培养皿

(直径50毫米，激光显微切割可用区域直径30毫米)

在带有PEN膜的培养皿中培养的细胞可在LCC模式下进行显微切割，并转移至其他培养皿（带或不带PEN膜）或其他合适的收集容器中。该膜可涂覆多聚赖氨酸或胶原以增强细胞粘附与生长。

Ibidi® 载玻片

(载玻片尺寸：26 x 76毫米，每孔可容纳30微升液体)

这些载玻片配有专为活细胞激光显微切割设计的凹槽。每片载玻片包含 18 个以PEN膜为基底的凹孔。

Ibidi®载玻片可与适用于LCC模式的所有收集器配套使用。

另一种无污染的方案是所谓的载玻片堆叠（图11b、11c），采用”三明治技术”将两片 Ibidi 载玻片上下叠放。经激光显微切割后的细胞会因重力直接落入固定在专用堆叠支架（图11b、11c）中的下一层 Ibidi载玻片上。既可进行后续再培养，也可对提取的细胞进行下游分析。

配套的盖帽可进一步避免污染。

Ibidi®载玻片也可与通用支架配合，用作像LOC一样的收集装置（图 11c）。

针对需要更高通量的实验，可提供96孔标准PCR板（半裙边、无裙边或全裙边）的方案，允许用户同步收集多达96个不同实验的样本材料。这些板可直接装入标准PCR仪中使用。此外，还提供适用于活细胞的96 孔板支架，例如用于克隆目的。

另有一种收集器选项，可直接将样本切割至由 Covaris®公司专为超声处理设计的特殊96孔板中。