用于三维生物成像的集成连续切片与冷冻电镜工作流程
使用UC Enuity和Aivia实现集成电子显微镜工作流程的实践指南

本场网络研讨会探讨了集成化工具如何支持从样品制备到图像分析的电子显微镜全流程。专家Andreia Pinto博士、Adrian Boey博士与Hoyin Lai博士将介绍UC Enuity超薄切片机和Aivia图像分析平台,并演示这些工具如何同时适用于常温与低温实验环境。会议内容包含阵列断层成像、基于深度学习的图像分割、以及生物成像中cryo-lift-out工作流程的实际案例解析。
网络研讨会的主要收获:
- 如何运用UC Enuity系统及AT(序列切片)模块优化体电子显微学连续切片流程
- 如何实现低温条件下的原位靶向以支持冷冻电镜工作流程
- 集成成像与AI驱动分析如何提升三维电镜数据解读能力
集成自动化、AI驱动图像分析与低温技术相结合,实现精准三维重构
深入了解如何运用徕卡显微系统的UC Enuity与Aivia平台优化电子显微镜工作流程。首先探索电动超薄切片机UC Enuity如何实现稳定高效的超薄切片制备——其自动对刀与自动修块功能可显著减少人工操作并提升结果可重复性,这对阵列断层成像技术尤为关键,因为保持切片完整性是确保三维重构准确度的核心。
通过毛滴虫寄生虫样本制备的实际案例,观察这些工具的具体应用:学习使用OTO染色法增强样本对比度,并制备超薄切片带用于下游成像。
随后深入徕卡AI驱动平台Aivia的图像分析功能:掌握如何利用标注后的电镜数据训练深度学习模型,实现细胞及细胞器的智能分割;运用三维对象重构与网格编辑工具,可视化鞭毛、氢化酶体、细胞核及溶酶体等结构;探索如何复用标注数据优化模型训练,并获取细胞器形态与定位的量化分析数据。
进一步将工作流程拓展至低温应用领域:了解如何将UC Enuity集成到冷冻样品制备流程,通过低温修块技术暴露玻璃化生物样本用于成像;运用UC Enuity低温配置与STELLARIS Cryo荧光显微镜定位目标区域。完整跟踪冷冻提取流程——从样品冷冻、荧光定位到Cryo-FIB SEM铣削与Cryo-TEM成像。
通过线虫和小鼠脑组织案例,掌握在复杂生物样本中定位并成像特定结构的全流程技术,包括共聚焦与SEM数据关联、薄片制备及三维重构——即使在面临表面伪影或冰污染等挑战性条件下仍能有效开展工作。
本次课程通过自动化技术、人工智能与低温方法的融合应用,为结构与细胞生物学研究提供具有实践价值的技术方案。