Controlling the TIRF Penetration Depth is Mandatory for Reproducible Results
The main feature of total internal reflection fluorescence (TIRF) microscopy is the employment of an evanescent wave for the excitation of fluorophores instead of using direct light. A property of the…
冷发光基础原理
自然界中有许多发光过程。冷发光是一系列发光现象的统称，是指不因高温而引发的发光事件。本文描述了不同形式的冷光并对荧光进行了详细介绍。在第二部分解释了描述荧光色素的相关技术术语，如淬灭、漂白或量子效率，以便对荧光分子的基础特性有更深入的了解。
全内反射荧光（total internal reflection fluorescent microscope，TIRF）显微镜
全内反射荧光（TIRF）是荧光显微镜技术中的一项特殊技术，由密歇根大学安娜堡分校的 Daniel Axelrod 于 1980 年代初开发。TIRF 显微镜能提供轴向分辨率低于 100 纳米的超高清晰图像，这使得观察膜相关过程成为可能。
全内反射荧光显微镜（total internal reflection fluorescent microscope，TIRFM）在生命科学研究中的应用
全内反射荧光显微镜的独特之处在于利用衰逝波激发荧光团。与传统的弧光灯、LED 或激光宽场荧光照明方式不同，衰逝波仅能从盖玻片/介质界面开始穿透样本约 100 纳米深度。
荧光蛋白--从起步到诺贝尔奖
荧光蛋白是近代荧光显微技术及其现代应用的基础。荧光蛋白的发现和随之而来的发展是上世纪生命科学领域最激动人心的创新之一，也是破译无数自然现象的起点。
Fluorescence Recovery after Photobleaching (FRAP) and its Offspring
FRAP (Fluorescence recovery after photobleaching) can be used to study cellular protein dynamics: For visualization the protein of interest is fused to a fluorescent protein or a fluorescent dye. A…
福斯特共振能量转移 (FRET)
荧光描述的是分子或原子在通过光的吸收激发电子系统后，自发发射光子的过程。发射的光子通常能量较低，因此波长较长（斯托克斯位移）。例如，蓝光激发可能导致绿色发射。如果第二个荧光分子能够吸收绿色光子，则该分子的发射再次发生斯托克斯位移，例如变为红色。这种再吸收在浓密样品中会导致测量误差（部分“内滤”效应）。在低浓度样品中，再吸收非常罕见。
显微镜中的荧光
荧光显微技术是一种特殊的光学显微镜技术。它利用的是荧光色素在一定波长的光激发下发光的能力。通过抗体染色或荧光蛋白标记，可以用这种荧光色素标记感兴趣的蛋白质。这样就可以确定单分子物种的分布、数量及其在细胞内的定位。此外，还可以进行共定位和相互作用研究，使用可逆结合染料（如 Ca2+ 和 fura-2）观察离子浓度，以及观察细胞的内吞和外吞过程。如今，利用荧光显微镜甚至可以对亚分辨率颗粒进行成像。
