冷发光基础原理
自然界中有许多发光过程。冷发光是一系列发光现象的统称,是指不因高温而引发的发光事件。本文描述了不同形式的冷光并对荧光进行了详细介绍。在第二部分解释了描述荧光色素的相关技术术语,如淬灭、漂白或量子效率,以便对荧光分子的基础特性有更深入的了解。
活细胞成像简介
了解复杂且快速变化的细胞动力学是深入探索生物进程的重要一步。因此,现代生命科学研究越来越需要关注于在分子水平上实时发生的生理事件。
全内反射荧光显微镜(total internal reflection fluorescent microscope,TIRFM)在生命科学研究中的应用
全内反射荧光显微镜的独特之处在于利用衰逝波激发荧光团。与传统的弧光灯、LED 或激光宽场荧光照明方式不同,衰逝波仅能从盖玻片/介质界面开始穿透样本约 100 纳米深度。
全内反射荧光(total internal reflection fluorescent microscope,TIRF)显微镜
全内反射荧光(TIRF)是荧光显微镜技术中的一项特殊技术,由密歇根大学安娜堡分校的 Daniel Axelrod 于 1980 年代初开发。TIRF 显微镜能提供轴向分辨率低于 100 纳米的超高清晰图像,这使得观察膜相关过程成为可能。
荧光蛋白--从起步到诺贝尔奖
荧光蛋白是近代荧光显微技术及其现代应用的基础。荧光蛋白的发现和随之而来的发展是上世纪生命科学领域最激动人心的创新之一,也是破译无数自然现象的起点。
比例成像
细胞的许多基本功能在很大程度上依赖于离子(例如钙、镁)、电压势和细胞质与周围细胞外空间之间的 pH 值的微妙但动态的平衡。这些平衡的变化会显著改变细胞的行为和功能。因此,实时测量细胞内离子、电压和 pH…
Fluorescence Recovery after Photobleaching (FRAP) and its Offspring
FRAP (Fluorescence recovery after photobleaching) can be used to study cellular protein dynamics: For visualization the protein of interest is fused to a fluorescent protein or a fluorescent dye. A…
福斯特共振能量转移 (FRET)
荧光描述的是分子或原子在通过光的吸收激发电子系统后,自发发射光子的过程。发射的光子通常能量较低,因此波长较长(斯托克斯位移)。例如,蓝光激发可能导致绿色发射。如果第二个荧光分子能够吸收绿色光子,则该分子的发射再次发生斯托克斯位移,例如变为红色。这种再吸收在浓密样品中会导致测量误差(部分“内滤”效应)。在低浓度样品中,再吸收非常罕见。
CARS 相干反斯托克斯拉曼散射显微镜简介
共聚焦和多光子成像技术仍然是对生物样本进行复杂研究的首选方法。这些技术可将生物样本中的典型结构或动态过程可视化,并依赖于样本中现有的自发荧光物质或合适的荧光染料。传统染色方法的缺点显而易见:标记耗时,染料会随时间褪色。此外,染料会失去强度并改变样本。染料通常会产生光毒性,对样本造成伤害,进而影响实验结果。CARS(相干反斯托克斯拉曼散射)显微镜是一种无需染料的方法,它通过显示结构分子的内在振动对比…