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系统评估透明化方案的质量标准

实现已透明化三维多细胞球体和有机体单细胞分辨率的光片成像指南

[Translate to chinese:] Single-cell Huh-7D12 spheroid imaged using a Leica SP8 DLS microscope system. The spheroid was clarified using the Sucrose protocol. A_Quality_Metric_and_Light_Sheet_Imaging_Guideline_teaser.jpg

三维多细胞球体由于比标准二维细胞培养更能模拟体内肿瘤环境，因而在研究肿瘤行为及评估药理活性物质反应方面具有重要价值。然而，尽管球体具备生物学上的优势，使用现有的显微镜解决方案观察大型三维球体内部最深层的单个细胞依然面临挑战，主要是因为光散射导致的穿透问题。

通过结合荧光光片显微技术和光学透明化方法，可以解决这一难题。近期研究比较了评估透明化方法效率的多个指标，并描述了使用SP8 DLS显微系统分析多细胞聚集体以达到单细胞分辨率的成像指南。

DLS的一个主要优势是它可以从两侧照亮样本。采用直径约250微米，来自三种不同细胞系的球体进行了分析，并使用五种不同的透明化方法揭示了其内部细节。包含90个荧光染色细胞球体的完整三维数据集已与学术社区共享。为了定量比较光学透明化方法并帮助用户选择最适合其特定实验的方法，这提出了一个新的评价图像质量的指标。

图 1：A：使用 Leica SP8 DLS 显微系统拍摄的单细胞 Huh-7D12 小球。使用蔗糖方案对球形体进行透明化；使用 DRAQ5 对细胞核进行染色。B：同一细胞球体中间区域的单个 Z 平面。
图 2：未透明化和已透明化球体的明场图像（从上到下）： 分别为 ClearT、ClearT2、CUBIC、ScaleA2 和 Sucrose 方案。

点击阅读全文:

A Diosdi, D Hirling, M Kovacs, T Troth, M Harmati, K Koos, K Buzas, F Piccinini, P Horvath:

用于比较评估三维多细胞球体光学透明化方案的定量指标

计算与结构生物技术杂志，19:1233-1243，2021 年 2 月。DOI: 10.1016/j.csbj.2021.01.040

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2001037021000441

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