培养的皮层神经元 (宽场原始数据)
使用 THUNDER Imager 3D Cell Culture 摄取

高通量,可实现更好的统计和工作流程效率

为您的 3D 细胞培养试验实现自动化,高效研究新一代疾病模型。THUNDER 能助您对肺器官等大体积样品进行高速成像。此外,自动化还能在繁琐的实验中将用户的操作步骤减至最低。

您将:

  • 在更短的时间内获得精确可靠的数据
  • 获得更高的通量
  • 获得更好的统计和结果

叠加图像:培养的皮层神经元。绿色为 beta-III-微管蛋白;蓝色为细胞核。
深度 21 µm 的 Z 轴层扫图像,包含 59 层扫描平面,使用 THUNDER Imager 3D Cell Culture 摄取。原始图像与使用 THUNDER Large Volume Computational Clearing 摄取的图像进行比较。
样品特别感谢:德国马格德堡 (Magdeburg),FAN GmbH 公司。

找到适合您的 THUNDER 成像系统

无论您是寻找特别适合某个特定应用的专用高端成像系统,还是寻找用不同样本进行各类实验的多样化实验室解决方案,我们都可为您提供合适的产品。

下面是一些展示 THUNDER 优势的精选应用示例:

用 THUNDER 可靠量化整个小鼠视网膜

视网膜成像的定量分析方法通常注重于提供视网膜形态和功能的综合描述。 视网膜异常以及转化临床应用都需要可靠的工作流程来重现转基因靶点筛选。 因此,形态学的重复成像需要能够持续重现准确结果的系统解决方案。 使用 THUNDER Imager 3D Assay,您可以清晰地观察形态以及可靠地计算细胞内部细节,例如视网膜中的单个细胞核分布。

THUNDER Imager 3D Assay 可为您提供以下优势

  • 立即去除模糊,帮助您观察到更多细胞内部细节
  • 通过宽视场方法获得更大的可利用深度
  • 可靠量化
  • 可立即用于特定的工作流程分析

THUNDER Imager 3D Assay 配置

对照组瑞士成年小鼠全组织视网膜,显示 Iba1 + 小胶质细胞(Alexa Fluor® 488 绿色荧光染色)和 Brn3a + 视网膜神经节细胞(Alexa Fluor® 594 红色荧光染色)。 图片由西班牙 Murcia 大学的实验眼科学小组提供。

使用 THUNDER Imager 3D Cell Culture 进行大脑类器官可视化成像

作为新型模式系统,大脑类器官可用于研究人类大脑的发育和疾病。 这些自组装式三维细胞结构通常通过多重转基因标记物成像进行表征。 这些工作流程中的典型挑战是及时量化分子动力学,同时保持生理条件并在低信号水平下依然能达到样本深度。 因此,THUNDER Imager 3D Cell Culture 适合用于研究接近生理条件的类器官的发育,因为我们的 LED 光源有助于最大限度地减少光漂白。 此外,即使蛋白质信号水平低,也可以定时表达而无需改变样本载体。

THUNDER Imager 3D Cell Culture 可为您提供以下优势

  • 可以观察塑料底培养皿中的样本,使您的工作流程更高效
  • 能够通过高量子效率(QE)相机检测分子的低信号
  • 采用宽视场方法和精确的定时 LED 照明,因此光漂白低,样本扰动小

THUNDER Imager 3D Cell Culture 配置

细胞核(DAPI)、Pevimentin(AF488)、Dcx(AF568)、Pax6(AF647)。 未经透明化处理的人脑类器官(4种颜色);图片由德国Erlangen大学医院的 Attria Kavyanifar 硕士提供 (由Lie教授、Wiener教授督导)。

长时间活细胞延时成像中的低光毒性

外植体细胞培养通常难以进行成像实验,因为它们需要稳定的细胞培养环境和低光毒性的成像条件。 美国弗吉尼亚大学 Laura Shankman 博士的外植体细胞培养成像实例显示了腹主动脉细胞如何在48小时内稳定成像。 THUNDER Imager Live Cell 为微创和活细胞准确成像实验提供完整的显微镜成像系统。 凭借快速的高量子效率相机选项、准确的载物台、可调 LED 光源、减少宽场图像中离焦模糊现象的计算清除技术(Computational Clearing)以及易于使用的 LAS X 软件进行自动成像和分析工作流程,可以高效地执行敏感的细胞培养实验。

THUNDER Imager Live Cell 提供的优势

  • 可通过准确的活细胞成像实验跟踪细胞的快速运动
  • 低光毒性可确保敏感的活细胞培养,即使在长时间实验中也是如此
  • 加快活细胞成像工作流程,实现自动化定量和分析

THUNDER Imager Live Cell 配置

培养一周的腹主动脉外植体,在凝胶覆盖的#1.5腔室载玻片上48小时成像。 小鼠进行了平滑肌细胞特定表达的 tdtomato 的基因编码。 转录后,平滑肌细胞去除 tdtomato,并开始表达 eGFP。

优化生理条件 - 最低曝光量

对于 3D 细胞培养,遵循真正的生理学是获得有意义结果的首要条件。通常情况下,您希望通过优化实验条件,在细胞接近自然状态时对其进行研究,即尽可能实现最低光强和最短曝光时间。

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 凭借高端 LED 源满足这些需求,该 LED 源具有针对激发光优化的小带宽。灵敏的高端 sCMOS 摄像头,拥有高达 82% 的量子效率,即使光线暗,曝光时间短,仍可传输重要的图像信息。

为了进一步减少样品曝光,照明限制为实际记录时间。摄像头快门与高速 (切换时间 20 µs) Lumencor LED 光源同步,以最大程度减低光淬灭。

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 以全电动 DMi8 显微镜、量子载物台、高度灵敏的 DFC9000 GTC 摄像头以及多谱线高光强的荧光 LED 光源为基础, 经过优化,可对 3D 细胞培养物进行快速精确的多位置、多通道成像。

衍生自肺泡干以及祖细胞的小鼠肺器官。样品特别感谢:德国巴德瑙海姆 (Bad Nauheim),马克斯·普朗克心肺研究所 (MPI),Pumaree Kanrai 博士。

与活体流动保持一致速度来成像 – 细胞进程

活体代谢过程极快,尤其对于单细胞维度而言。如今大多数的活细胞成像实验都是在高速成像系统上完成的。

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 能够一次完成全帧摄取,让您体验到高度灵敏、基于 sCMOS 摄像头的荧光系统的强大实力。

结合其高度灵敏性,THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 可实现高达 90 帧/秒的数据摄取速度,助您观察到快速的细胞活动。即使深入较厚的 3D 细胞团,它也能快速摄取清晰的图像数据。得益于可快速切换的外部滤色片转盘 (< 27 ms),即使在多发射波长的实验过程中,您也能始终掌握快速成像过程。

在观察活细胞培养物的同时保持适当的环境

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 具有将您的细胞保持接近自然状态所需的一切功能。培养箱可为活细胞培养物确保理想的生理条件,例如,系统稳定性、湿度、温度以及二氧化碳水平 (pH 值)。

凭借微型自动补水器,即使您正在进行长期实验,也可以使用水浸物镜执行多位置工作流程。水浸物镜具有更高的光收集性能,使摄取的细胞图像具有更高的对比度和分辨率。

培养的 VERO 细胞,使用 STAR488 Vimentin (绿色)、STAR580 Tom20 (黄色) 和 DAPI (蓝色) 染色。样品特别感谢:德国哥廷根 (Göttingen),Abberior GmbH 公司。

轻松驾驭间歇摄取多位置实验:追踪细胞变化

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 为您的 3D 活细胞培养多位置实验兼顾速度与可靠性。例如,在追踪球状细胞团和类器官的成长和发育时,其速度和可靠性将助您获得理想的结果。

得益于以下优势,使用 THUNDER Imager 可完成准确的间歇摄取多位置实验和细胞变化追踪:

  • 通过自适应调焦控制 (AFC) 实现可靠的 Z 轴偏移修正
  • 软件自动对焦,可补偿样品位置的变化
  • 以高达 20 nm 的重复精度实现可精准重现的 Z-定位 (闭环对焦)

通过新的量子载物台,在更短的时间内获得更多数据信息。该载物台无抖动,可快速准确地移动到所有位置 (例如,10 个位置/秒),具有卓越的可重现性 (< ±0.25 µm)。

可靠的日常数据摄取

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 能够始终将焦点保持在活细胞上,实现可靠的图像数据摄取。

由于漂移、形态变化或生长,活细胞成像通常十分棘手。漂移是由于振动、机械蠕变或温度波动导致的。漂移和细胞变化都会降低所摄取图像数据的可靠性,因为对焦是一个问题。但得益于自适应调焦控制 (AFC)、闭环对焦和软件自动对焦功能,THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 能够为您的多孔实验可靠地保持聚焦。 

宽场
THUNDER Imager

发育中的斑马鱼胰腺

THUNDER 3D Assay 成像系统能够清楚地识别发育中的斑马鱼胰腺内的 α(绿色荧光蛋白)细胞和 β (mCardinal-red)细胞。

这个150层的Z轴层扫图像分别由蓝(Hoechst)、绿(GFP)、红(mCardinal)通道成像,全部影像在一分钟内完成。

通过最大限度减少光漂白、提供高性能成像和高通量数据,可以维持样本内部的生理条件,从而提高工作流程的执行效率。

图片由德国巴特瑙海姆的马克斯普朗克心肺研究所的 Radhan Ramadass 和 Yu Hsuan 提供

成像以及操控细胞培养实验

使用 Infinity Scanner 时,将 THUNDER 的非侵入性成像与光操控、FRAP、FRET 或消融技术结合。 使用 Infinity Scanner 灵活的矢量激光扫描系统控制所研究的细胞或其外部环境。

此处两个视频显示 MDCK 细胞在 THUNDER 即时计算清除(Computational Clearing)前后的 mx1-GFP 表达。 使用 THUNDER,mx1 蛋白表达更加易于识别,并可通过 Infinity Scanner 被消融。

THUNDER Imager 3D Cell Culture 与 Infinity Scanner 结合可进行成像以及操控细胞培养实验。

关于 Infinity Scanner 的更多信息

图片由德国马尔堡大学 Ralf Jacob 博士提供

图片由美国弗吉尼亚大学Catherine Boyle博士提供。

清晰、快速地进行敏感样本成像

将 THUNDER 的离焦模糊去除功能与 TIRF 的优势相结合。 对于细胞表面的动力学过程,全内反射荧光显微镜可提供出色的信号背景分离。

此处两个视频显示用 GFP-GRINCH 表达人胰岛素原的 ins-1 细胞。 在细胞培养中加入 KCL 后,产生胰岛素的细胞去极化,可以观察到残留的胰岛素与细胞质膜融合。

THUNDER Imager Live Cell 与 TIRF 相结合,能够以出色的清晰度、速度和成像参数控制对敏感的样本成像。

关于 Infinity TIRF 的更多信息

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