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荧光

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荧光

荧光是生物和分析显微镜中最常用的物理现象之一,主要是因为它具有灵敏度高、特异性强的特点。荧光是冷发光的一种形式。用户可以通过显微镜来捕捉单个荧光分子的种类、分布、数量及其在细胞内的定位。用户可以进行荧光分子共定位和相互作用的研究,也可以观察在细胞内和细胞间运作离子浓度的变化,如胞吞和胞吐。借助超高分辨显微镜,我们甚至可以对亚细胞器的结构进行成像。
Leica DMi8 荧光成像

荧光显微镜

用于研究应用的荧光显微镜以一组光学滤色镜为基础:

  • 激发滤色镜
  • 二向分色镜
  • 发射滤色镜

滤色镜通常放在滤色镜盒(复合显微镜)或平支架(主要为体视显微镜)中一起插入显微镜中。

激发滤色镜选择波长来激发样品中特定的染料,而发射滤色镜只允许荧光团发射的特征波长穿过,从而起到一种质量控制的作用。 二向分色镜的用途是反射激发谱带内的光,并传输发射谱带内的光,从而实现经典的落射荧光入射光照明。

荧光立体显微镜 Leica M165 FC 和 M205 FA

荧光体视显微镜

Leica Microsystems 的荧光体视显微镜使用 TripleBeam 技术 一个无需分色镜的单独的(第三个)样品荧光照明光路。

因此,需要一个用于照明光路的激发滤色镜和分别用于两个观察光路的两个发射滤色镜。

荧光显微镜相机

要获取荧光图像,必需使用适当的 CCD 或 sCMOS 荧光相机

Leica Microsystems 提供专用的荧光相机,可满足所有应用需求。 

每个相机都能提供合适的灵敏度和图像质量组合,确保得到优质结果。

荧光显微镜软件

简单的实验设置和操作控制对荧光显微镜越来越重要。

专用的 Leica 图像应用软件 (LAS) X软件平台可以简化实验设置,即使复杂实验也不例外。

LAS X 可引导您完成从实验设置到成像数据分析的全过程。 从简单的多通道实验到复杂的 3D 分析,LAS X 都是合适的软件平台。

关于荧光显微技术

荧光显微已成为现代生物学和医学中最重要的物理现象。

在缓慢的起步阶段之后,特异性荧光染色方法在上世纪30年代初大力推动了这种应用。 1950年左右,免疫荧光染色的发明开启了该技术的第二阶段。

功能成像,特别是通过 Ca++ 探针进行的功能成像,使该技术摆脱了形态和结构成像的束缚。 使用靶向可表达荧光蛋白观察活物质的方法为荧光显微技术带来了巨大的变革,形成了出乎意料且广泛的第三个发展阶段。

现在,每周都会出现各种利用特异性荧光蛋白特征的新方法。 而且重要的是:所有超分辨成像模式都以荧光为基础。

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