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Sample Preparation for GSDIM Localization Microscopy – Protocols and Tips
The widefield super-resolution technique GSDIM (Ground State Depletion followed by individual molecule return) is a localization microscopy technique that is capable of resolving details as small as…
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冷冻替代的简要介绍
冷冻替代是一种在足够低温的条件下进行的脱水过程,以避免形成冰晶,并有效规避在环境温度下脱水后观察到的破坏性影响。在冷冻替代期间,“冷冻”水被有机溶剂溶解,有机溶剂通常也含有化学固定剂。冷冻替代与细胞成分的即刻物理固定(冷冻固定)以及树脂包埋相关联。一旦替代完成,样品会逐渐升温,并与常规制备的样品一样进行进一步处理。与化学固定技术相比,成功的冷冻固定及后续FS处理显示出优良的精细结构保存[2]。即使…
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Video: How to Achieve Fast Precise Cutting Lines in Laser Microdissection
This video explains the laser beam deflection principle of Leica Microsystems‘ laser microdissection systems (Leica LMD). The laser, the beam expander, motorized attenuator, motorized iris diaphragm…
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EM样本制备中对比显影的简要介绍
由于电子显微镜中的对比显影主要取决于细胞中有机分子的电子密度差,因此染色效率需取决于附着在生物结构上的染色剂的原子量。所以在电子显微镜中使用最广泛的染色剂是重金属铀和铅。尽管单独使用其中一种染色剂对于常规用途来说较为实用,但依次使用这两种染色剂(醋酸铀UA和柠檬酸铅的“双重染色”)则可以获得最高的对比度。
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玻璃制刀机介绍——用于电子显微镜和光学显微镜
超薄切片机需要使用玻璃刀,为电镜和光镜提供超薄样本切片。
对于树脂切片和冷冻切片(Tokuyasu样本)的玻璃刀,其刀锋必须非常锋利、坚固、稳定。采用断裂法制备优质玻璃刀时,玻璃条的质量非常重要。玻璃条由精选玻璃生产而成,厚度和质量均经过精确把控。只有采用高质量标准来严格把控公差,才能从一块玻璃中制出两把优质玻璃刀。
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电子显微镜镀膜技术简要介绍
电子显微镜领域需要对样本进行镀膜处理才能改善样本的成像效果。在样本上形成一层金属导电层可抑制电荷聚积、减少热损伤,并改善SEM对样品拓扑结构检测所需的二次电子信号量。在x射线显微分析中,网格上支持膜,TEM观察复型样品中的背底支撑膜,涉及既对电子束透明但同时具备导电效果的精细碳膜。具体需要采用的镀膜技术取决于分辨率和应用。
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Handbook of Optical Filters for Fluorescence Microscopy
Fluorescence microscopy and other light-based applications require optical filters that have demanding spectral and physical characteristics. Often, these characteristics are application-specific and…
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高压冷冻简介
水是细胞最主要的组成部分,因此对于维持细胞超微结构至关重要。目前,冷冻固定是固定细胞成分,而不导致其显著结构变化的唯一途径。现阶段有两种常见的方法:投入冷冻与高压冷冻固定。
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FRAP实验步骤式指南
漂白后荧光恢复(FRAP)已被认定为观察大分子平移扩散过程方面使用最为广泛的一种方法。由此产生的信息可用于确定动力学性质,如扩散系数、流动分数和荧光标记分子的传输速率。FRAP实验利用了短激光脉冲的荧光团辐照。先进的激光扫描显微镜如TCS…