如何通过激光显微切割改进您的阿尔茨海默蛋白分析

具有自动斑块识别和切除的阿尔茨海默蛋白分析工作流程

徕卡激光显微切割系统将通过自动识别和解剖您的感兴趣区域改进您的工作流程。

这为蛋白质组学提供了充足和纯净的起始材料，一切都在视觉控制下进行，没有被周围组织污染。

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通常，激光显微切割使用特殊的基于膜的载玻片。激光显微切割的样品制备简单明了，可以从传统的组织学制备中得到。

对于下游蛋白质组学，我们推荐使用几乎不含增塑剂的 PET 膜载玻片，或者使用完全无膜烧蚀的 DIRECTOR™  载玻片。

石蜡包埋将组织样本制成可切成薄片的构造。或者您可以利用冷冻切片法来准备载玻片。

我们将为您的应用程序提供适当的 LMD 演示说明。

根据 β-淀粉样蛋白抗体的 DAB 染色，可以可视化淀粉样斑块。这导致在明场显微镜中淀粉样斑块呈棕色染色（右侧）。DAB 也可以与新月紫染色结合使用。

另一种选择是康哥红，它可以染色甲醛固定、石蜡包埋（FFPE）以及冷冻组织切片中的淀粉样物质。

β-淀粉样蛋白抗体也可用于免疫荧光显微镜，这也适用于徕卡 LMD 系统。

徕卡 LMD 激光显微切割系统可以生成自动样本概览，可用于轻松导航到您感兴趣的区域（ROI）。

您的 ROIs 可以由 ADM 软件模块自动识别和标记，或者您可以手动应用形状。

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• 激光微解剖文章和教程

接下来，通过视觉控制，激光精确地解剖定义的 ROIs，并通过重力直接收集。

通过几次鼠标点击，将受疾病影响的材料或任何其他感兴趣的区域隔离出来，并根据需要将其汇集到一个或多个反应容器中。

此外，您可以使用“移动和剪切”工具直接在飞行中剪切样本，而无需预定义的形状。

通过重力收集可使用标准、经济实惠的 消耗品 ，如 PCR 管或 8 条管。

从已建立的方案中可以从解剖样品中提取蛋白质并为下游分析做准备。这些方案可能会因上游样品嵌入方法以及目标蛋白质分析技术而有所不同。

这里列出了一些示例：

• 冷冻样品和 Western-Blotting (Del Turco 等人)
• FFPE 样品和 LC-MS/MS (Cahill 等人)
• FFPE 样品和 LC-MS/MS (Drummond 等人)
• Cryo 样本和 LC-MS/MS (Hondius 等人)

以下蛋白质分析技术已成功通过从 LMD 获得的蛋白质进行测试：

• LC-MS/MS
• ESI-MS/MS
• SDS-PAGE
• Western Blotting
• 2D-DIGE
• MALDI-TOF
• SELDI-TOF
• NMR

典型的研究领域

• 淀粉样变性
• 癌症
• 其他疾病
• 药物发现
• 植物研究