Rolf T. Borlinghaus , Dr.

Rolf T. Borlinghaus

Rolf Borlinghaus was born 1956  in Grötzingen, Germany. After his diploma in Biology he worked on electrogenic steps of the Na/K-ATPase by laser-induced release of ATP from a caged compound at Peter Läuger’s Laboratory in the Biophysics Department, University Konstanz, Germany from where he was promoted to Dr.rer.nat. in 1988. He started working as a Product Manager for research Fluorescence and confocal Microscopes with Carl Zeiss, Oberkochen in 1990 and continued to tackle this challenge at Leica in 1997 (at that time Leica Lasertechnik, Heidelberg). For personal insights, in 2007, Rolf Borlinghaus dispensed his managerial responsibilities and is now supporting the confocal marketing group as senior scientist in a half-time position. The other half is dedicated to relations, food and botany.

Springer publications:

2017 Die Lichtblattmikroskopie (DE)

2017 The White Confocal (EN)

2016 Konfokale Mikroskopie in Weiß (DE)

2016 Unbegrenzte Lichtmikroskopie (DE)

Rolf Borlinghaus retired in December 2020.

After learning in May 2021 that Rolf has died, his colleagues would like to express their gratitude and appreciation for his numerous years of dedication to Leica Microsystems and its customers. He will be remembered for his many contributions to the field of microscopy which were published on Science Lab and in scientific journals and books.

超越反卷积

宽场荧光显微镜通常用于视觉呈现生命科学样本中的结构并获取重要信息。利用荧光蛋白或染料,以高度特异性的方式标记离散的样本部分。为了充分了解某种结构,可能需要以三维方式呈现,但这会对使用显微镜带来某些挑战。

阿尔茨海默斑块:厚切片中的快速可视化

超过 60%的所有诊断为痴呆症的病例归因于阿尔茨海默病。该疾病的典型特征是脑组织的组织学改变。目前尚无治愈该疾病的方法。一些治疗方法试图减缓致命的进程或缓解患者的症状。梅赫达德·沙姆鲁博士的实验室研究病理性脑功能,旨在为阿尔茨海默病的新疗法的发现做出贡献。他们使用这种疾病的小鼠模型研究炎症在阿尔茨海默病进展中的作用。这需要对厚的未清除脑组织进行成像。
Zebrafish Whole Brain imaging with Leica SP8 spectral confocal laser scanning microscope

斑马鱼大脑高分辨率全器官成像

结构信息是理解复杂生物系统的关键,而脊椎动物的中枢神经系统是最复杂的生物结构之一。要想从发育中的斑马鱼身上分离出一个完整的大脑,我们需要覆盖大约10平方毫米的区域,深度在毫米范围内。通常,低倍透镜不能提供足够的分辨率来揭示神经组织中复杂结构之间的相互作用。此外,由于散射过程,使用共聚焦显微镜在致密生物组织内成像深度通常限制在大约10微米。

什么是光谱探测器(SP 探测器)?

徕卡显微系统的 SP 探测器是一种用于点扫描显微镜(尤其是共聚焦显微镜)的复合检测单元。SP 探测器可将光分成多达 5 个光谱带。这些光谱带是独立的,并且在整个可见光谱内可以连续调节。每个光谱带中的光由光传感器检测:光电倍增管(PMT)或混合探测器(HyD)。

什么是共振扫描头?

共振扫描头是一种振镜扫描系统,可使用于单点扫描显微镜(真共焦和多光子激光扫描)快速获取图像。为了跟踪快速的过程,特别是在活体样品中,需要较高的采集速度。并且提供更好的荧光信号,减少光漂白 (1)。

什么是视场扫描仪?

视场扫描器是单点共聚焦显微镜中使用的振镜扫描组件,可对大视场尺寸进行正确的光学记录。与传统的双镜扫描仪相比,视场扫描仪采用了三镜概念,在不影响高速扫描的情况下提供了更高的照明均匀性。振镜扫描仪的速度和位置可控,允许缩放和平移功能以及调整扫描频率。它们还可以进行静止点照明,例如 FCS 测量所需的照明。

解析视场数(RFN)

光学显微镜的视场数(FN)表示视野大小(FOV)。它对应于中间图像中通过目镜可以观察到的区域。虽然我们不能一次观测到很大的视野,但人眼可以扫描并整合整个视野的结构特征。重要的是,该领域的大小和分辨率适合人眼能力。

什么是串联扫描器?

串联扫描器集成了两种不同类型的扫描技术于一体,以实现真正的共焦点扫描。该系统包括一个三镜头扫描基座,其x轴扫描器可以与一个电动装置进行互换。这一组合不仅允许通过FOV扫描器实现大面积高分辨率扫描,还可以通过共振扫描器对极速过程进行扫描,两者均在同一仪器中完成。

什么传感器最适合共聚焦成像?

混合光电探测器(HyD)是最好的!为什么会这样,这篇简短的文章中有解释。
Multiphoton microscopy of an unstained mouse skin section acquired using the 4Tune detector.

不可能的任务:可调颜色用于非扫描检测

徕卡显微系统的 4Tune 探测器是 SP8 DIVE 深度体内探测器的关键组件,提供具有非扫描检测的光谱可调图像记录,是多参数多光子显微镜的创新解决方案。
„Confetti-Mouse“, taken with the 4Tune spectral detector of Leica’s Deep in-vivo Explorer SP8 DIVE.

Laser Beam Shaping for Multicolor Multiphoton Microscopy

Multiphoton Microscopy is one of the current hot topics in life science research. The new Leica TCS SP8 DIVE from Leica Microsystems presents a series of beneficial new innovations, including a freely…

共聚焦显微镜的主分光装置

当前荧光显微镜采用入射照明,这需要将照明和发射光分开。传统的分光设备是一个颜色依赖的分光镜,它具有固定的光谱参数,并通常在指定的波长带内透射90%至98%的发射光。透射率依赖于波长,但也受到技术、设计和实验需求的影响。声光光束分割器(AOBS)则是一种可自由调节的反射缺口设备,平均95%的发射光在这些狭窄的缺口间透射。
Pinhole diameter and diffraction pattern.

共聚焦显微镜针孔效应

在操作共聚焦显微镜,或在讨论这种装置的特性和参数时,我们不可避免地提到针孔及其直径。这篇简短的文章是针对那些没有足够时间钻研共聚焦显微镜的理论和细节但又想了解针孔效应的用户们来解释针孔的意义。
© wowomnom – Fotolia.com

从光到思维:共聚焦显微镜中的检测器和测量技术

本文概述了共聚焦显微镜中常用的重要传感器。“共聚焦显微镜”在此特指“真共聚焦扫描”,即仅对单点进行照明和测量的技术。本文旨在为用户提供不同技术之间清晰的概览,并针对不同应用场景给出合适的传感器选择建议,而非深入探讨专业细节。
Schematic graph of the light path in a Spalt-Ultramikroskop.

共聚焦成像和光片成像

光学成像仪器可以放大微小物体,聚焦遥远星体,揭示肉眼看不见的细节。但是,它有一个众所周知且令人烦恼的问题:景深有限。我们的眼睛(也是一种光学成像装置)也有同样的困扰,但我们的大脑在信号到达意识认知之前会巧妙地移除所有不在焦点上的信息。
Acousto-optics, sketch

声光调制在全光谱型激光共聚焦显微镜系统的应用

荧光最显著的特征是照射光(激发光)和检测光(发射光)颜色之间的偏移,称为斯托克斯位移。因此,在荧光成像中,不仅要将激发光和发射光的相应波长过滤出来,还需要将激发光从发射光中分离。过去,通常用平面光学元件,包括灰色或彩色滤光片和反射镜进行滤光和分光。虽然有多种平面光学元件可供使用,但固定的规格和低切换效率使其在使用上具有局限性,并且采用不同角度或梯度的涂层作为激发光和发射光的调谐方法也被证实并不可行…

光谱检测-如何设定特定探针发射光的光谱检测范围

为了拆分多色成像的发射光谱,首先由分束器或色散元件将不同颜色的光引入到不同的方向[1],带通滤片则能够最大限度地减少串色,并抑制所有残留的激发光,最终到达传感器。在过去,常使用的滤片是普通的玻璃带通滤片。如今,一项革命性的设计诞生了,那就是在多波段组件(SP探测器)中使用光度计滑块。该设计可以极为有效地探测发射光,同时提供完全可调谐性,与此同时带来的好处是使光谱扫描成为了可能。使用白激光作为光源时…
Live cell imaging, 4 colors: Mitochondria (MitoView Green, yellow) and actin (mNeonGreen, cyan) microtubuli (SIR-tubulin, magenta), endosomes (NIR750, green). Processed with DSE and DSE powered by Aivia.

白激光

在生物医学应用中,共聚焦显微镜的完美光源它应该有足够的强度,可调谐的波长,以便同时激发一系列样品。此外,它应该成为荧光寿命实验的脉冲光源。这样的光源已经出现:白激光。它采用高能脉冲红外光纤激光器经过光子晶体光纤以产生连续光谱。通过声光调制滤片从该连续光谱中选择窄带激光。

共聚焦光学截面厚度

共聚焦显微镜用于光学切片比较厚的样本。最直接的问题是:1. 什么是“比较厚的样本”;2. 光学切片到底有多厚?这两个问题在一定程度上是相关的,即假设一份厚样本至少比光学切片厚10倍。
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