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EM Cryo CLEM 显微镜是我们的冷冻工作流程中的关键要素。 我非常需要它。

海德堡欧洲分子生物学实验室(德国)电子显微镜核心设备团队领导兼负责人 Yannick Schwab 博士

未使用 THUNDER 成像系统的 HeLa 细胞
使用 THUNDER 成像系统的 HeLa 细胞

使用 THUNDER 可以更清晰地识别和显示您感兴趣的区域

为了最佳显示细胞结构,THUNDER EM Cryo CLEM成像系统将高分辨率的冷冻物镜与徕卡显微系统的 THUNDER 技术相结合。 从而获得清晰、无焦外模糊的图像。

THUNDER 采用创新的徕卡成像解析技术 (Computational Clearing) 方法,可消除宽场观察时会出现的离焦模糊信号。 THUNDER EM Cryo CLEM 成像系统还包括一个50倍/数值孔径0.9的物镜。 与常用的长工作距离物镜相比, 该透镜专门为玻璃化样本的高分辨率成像而设计。 得益于宽场显微镜的高速度和易用性,您能更好地识别和观察细胞结构的微小细节。

交互式图像: HeLa 细胞放在 Quantifoil R2 / 2 金膜的 G200F1 载网上。
细胞使用 GFP-TGN46(标记反面高尔基网状结构TGN)和 mCherry-Lifeact(标记纤维状肌动蛋白)转染。 细胞核使用 Hoechst 33342 染色。 样本由英国伦敦弗朗西斯·克里克研究所的 Lucy Collinson 提供。

简单、可重复的工作流程

如果您需要在电子显微镜中快速找到感兴趣的区域,可轻松标记该区域并在样本传送过程中导出坐标。 直观的软件将引导您完成整个工作流程,使您快速有效地获得所需的结果,有助您使用电子显微镜成功进行研究。 为了获得高分辨率、无焦外模糊的成像结果,请使用 THUNDER 进行后期处理。

您获得的优势:

  • 轻松而精确地定位目标、采集数据——软件将引导您逐步完成成像工作流程
  • 轻松成像——只需标记您感兴趣的区域,软件即可自动捕捉并精确进行全景大图拼接
  • 使用 THUNDER 进行后期处理,获得高分辨率、不模糊的图像
  • 快速、可重复获得的结果——您可以保存和调用完整的实验设置
THUNDER EM Cryo CLEM 成像系统
使用 EM Cryo CLEM ,对电子显微镜载网上呈现并选择性标记的细胞拍摄的荧光图像。
利用坐标标记,在 Thermo Scientific Aquilos 上呈现和精确检索定位了同一个细胞。

通过冷冻光学显微镜的坐标变换轻松检索

THUNDER EM Cryo CLEM 成像系统集成的软件不仅能够引导您完成整个成像工作流程,而且您只需点击一下即可导出原始图像数据和相关坐标。 您可以立即在您指定的电子显微镜中重新定位细胞靶区,并开始研究样本的超微结构。

如果您选择使用赛默飞世尔科技公司的 MAPS EM,还可以受益于我们共同开发的冷冻电子断层扫描工作流程。 从使用我们公司的 EM GP2 进行玻璃化冷冻,到使用赛默飞世尔科技公司的 Krios™ G3i 冷冻透射电镜进行 3D 图像重建,该工作流程集成了完整的技术。 

交互式图像: 选择和检索坐标。 在电子显微镜载网上呈现并被选择性标记的细胞荧光图像。 利用坐标标记,在 Thermo Scientific Aquilos 上呈现并精准再定位了同一个细胞。

保持冷冻条件 

为了尽可能获得成功的实验结果,我们采用独特的套筒系统和封闭式冷冻台确保样本保持玻璃状。 在装载和传输乃至长时间图像拍摄过程中,该系统可最大程度降低污染的可能性。

工作原理

使用套筒系统 (1) 可以安全快速地处理样本。 压夹机构可加快样本通量以及将载网装入冷冻台的时间。

传送对接口 (2) 通过保持最佳温度来保护冷冻样本。 

带有同步物镜盖的冷冻台 (3) 将样本保持在稳定的超压下,从而防止样本被空气污染

通过传送梭将载网套筒装入 THUNDER EM Cryo CLEM 成像系统

为您的生物学研究工作选择合适的工作流程

THUNDER EM Cryo CLEM 成像系统是一款灵活的多用途解决方案,可以运用在不同的电子显微镜工作流程中。

请为您的生物学研究问题相关实验选择最佳的工作流程,以便获得所需的答案。 如需详细了解生命科学研究领域的工作流程解决方案,请下载我们的工作流程手册

Cryo CLEM 工作流程

通过该工作流程,您可以分析冷冻切片样本的高分辨率超微结构。 对样本进行高压冷冻和冷冻切片。 之后,THUNDER EM Cryo CLEM 成像系统可帮助您识别感兴趣的区域,然后进行冷冻透射电镜成像。 该工作流程适用于组织样本。 

(1) 高压冷冻 (EM ICE)
(2) 冷冻切片 (EM UC7 / EM FC7)
(3) 识别感兴趣的区域(THUNDER EM Cryo CLEM 成像系统)
(4) 冷冻透射电镜成像

冷冻载网薄片工作流程——使用 Thermo Fisher Aquilos 冷冻聚焦离子束扫描电镜

在原生细胞环境中分析其蛋白质结构。 将样本快速冷冻,并打磨感兴趣的区域,以便在冷冻透射电镜中成像。 

(1) 快速冷冻 (EM GP2)
(2) 识别感兴趣的区域(THUNDER EM Cryo CLEM 成像系统)
(3) 使用 Thermo Fisher Aquilos 冷冻聚焦离子束扫描电镜进行打磨和镀膜
(4) 冷冻透射电镜成像

冷冻载网薄片工作流程——使用 Thermo Fisher Aquilos 冷冻聚焦离子束扫描电镜

冷冻载网薄片工作流程 —— 适用于所有其他聚焦离子束扫描电镜供应商

在原生细胞环境中分析其蛋白质结构。 将样本快速冷冻,并打磨感兴趣的区域,以便在冷冻透射电镜中成像。 

(1) 快速冷冻 (EM GP2)
(2) 识别感兴趣的区域(THUNDER EM Cryo CLEM 成像系统)
(3) 传送 (EM VCM)
(4) 镀膜 (EM ACE600 / EM ACE900)
(5) 传送 (EM VCT500)
(6) 聚焦离子束打磨
(7) 透射电镜成像 
 

冷冻载网薄片工作流程——适用于所有聚焦离子束扫描电镜供应商,Thermo Fisher Aquilos 冷冻聚焦离子束扫描电镜除外

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