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DMi8 S 高速成像平台 倒置显微镜成像解决方案

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Fluorescence microscopy image of liver tissue where DNA in the nuclei are stained with Feulgen-pararosanilin and visualized with transmitted green light.

Epi-Illumination Fluorescence and Reflection-Contrast Microscopy

This article discusses the development of epi-illumination and reflection contrast for fluorescence microscopy concerning life-science applications. Much was done by the Ploem research group…
[Translate to chinese:] Molecular structure of the green fluorescent protein (GFP)

荧光蛋白简介

本文概述了荧光蛋白及其光谱特性。随着 20 世纪 50 年代末荧光蛋白的发现,荧光显微技术发生了巨大变化。它始于 O. Shimomura 和来自水母(Aequorea victoria)的绿色荧光蛋白(GFP)[1]。后来出现了数百种 GFP…
[Translate to chinese:] Neurons imaged with DIC contrast.

微分干涉对比(DIC)显微镜

本文阐释了在使用显微镜对未染色透明生物样本进行成像时,微分干涉对比法(DIC)为何是明场照明的绝佳方案。
[Translate to chinese:] Image of MDCK (Madin-Darby canine kidney) cells taken with phase contrast.

相差和显微镜

相差是一种光学显微镜技术,用于增加未染色样本的对比度。未染色样本的结构,例如活细胞或其细胞器,在明场照明下观察时可能显得模糊,甚至变得透明。

浸没式物镜

要用显微镜在高倍镜下检查试样标本,有许多因素需要考虑。其中包括分辨率、数字光圈数值孔径(NA)、物镜的工作距离以及物镜前透镜采集图像所用介质的折射率。在这篇文章中,我们将简要地看一下如何使用浸泡介质在盖玻片和物镜前透镜之间利用浸泡介质帮助提高NA和分辨率。此外,我们还将考虑空气和构成载玻片和、盖玻片的空气和玻璃的折射率,以及当光从一种介质传播到另一种介质时,如何使用浸没介质部分地减少失错配。此外,…

组织中的精密空间蛋白质组学信息

尽管可使用基于成像和质谱的方法进行空间蛋白质组学研究,但是图像与单细胞分辨率蛋白丰度测量值的关联仍然是个巨大的挑战。最近引入的一种方法,深层视觉蛋白质组学(DVP),将细胞表型的人工智能图像分析与自动化的单细胞或单核激光显微切割及超高灵敏度的质谱分析结合在了一起。DVP在保留空间背景的同时,将蛋白丰度与复杂的细胞或亚细胞表型关联在一起。
[Translate to chinese:] Images of smooth muscle cells during wound healing. Courtesy L.S. Shankman, Ph.D., University of Virginia.

平滑肌细胞划痕愈合研究

本文主要讨论如何使用专门配置的徕卡倒置显微镜和台式细胞培养箱轻松、可靠地研究多孔板中培养的平滑肌细胞(SMC)的划痕愈合情况。血管受损后影响SMC增殖和迁移的信号转导情况在医学研究中有重要意义。由于SMC遍布全身,所以对其迁移情况的研究也有助于癌症和损伤的治疗。

如何为免疫荧光显微镜制备样本

免疫荧光(IF)是一种用于可视化观察细胞内过程、状态和结构的强大工具。IF制剂可通过多种显微镜技术(如激光共聚焦、宽场荧光、全内反射成像等)来加以分析,具体取决于应用目的或研究人员的关注重点。与此同时,在很多使用至少一套简易荧光显微镜的研究工作组当中,IF早已成为不可缺少的一部分。

荧光染料

荧光显微镜的基本原理是借助荧光染料对细胞成分进行高度特异性的可视化观察。这可能是一种与兴趣蛋白质遗传相关的荧光蛋白,如绿色荧光蛋白(GFP)等。如果克隆无法实现,例如在组织学样本上无法实现,则需要使用另一种技术如免疫荧光染色来对兴趣蛋白质进行可视化观察。为此,人们使用抗体来连接不同的荧光染料并将其直接或间接地结合到适当的靶点上。此外,借助荧光染料,荧光显微镜的应用就不再仅局限于蛋白质观察,还能对核…
[Translate to chinese:] Virally labeled neurons (red) and astrocytes (green) in a cortical spheroid derived from human induced pluripotent stem cells. THUNDER Model Organism Imager with a 2x 0.15 NA objective at 3.4x zoom was used to produce this 425 µm Z-stack (26 positions), which is presented here as an Extended Depth of Field (EDoF) projection.  Images courtesy of Dr. Fikri Birey  from the Dr. Sergiu Pasca laboratory at Stanford University, 3165 Porter Dr., Palo Alto, CA

下载活细胞成像指南

在生命科学研究中,活细胞成像是一种不可或缺的工具,可用于观察细胞的活体状态。这本电子书回顾了为确保成功进行活细胞成像而需要考虑的各种重要因素。

Plant Cell Development and Morphogenesis

The article discusses how tubulin molecules, which make up microtubules, in plant cells can be studied with total internal reflection fluorescence (TIRF) microscopy to better understand tubulin…

Factors to Consider When Selecting a Research Microscope

An optical microscope is often one of the central devices in a life-science research lab. It can be used for various applications which shed light on many scientific questions. Thereby the…
Sep 24, 2020
故事
Factors to Consider When Selecting a Research Microscope

Factors to Consider When Selecting a Research Microscope

An optical microscope is often one of the central devices in a life-science research lab. It can be used for various applications which shed light on many scientific questions. Thereby the…

显微镜在病毒学中的应用

引起新型冠状病毒肺炎(Covid-19)的冠状病毒SARS-CoV-2肆虐全球并影响了我们生活的方方面面。对于免疫和治疗方法的搜索研究(即如何抗击该病毒)成为了2020年全人类的第一要务。显微镜在这类研究中起着重要作用。为了了解受体结合、基因组释放、复制、装配和病毒出芽的基本原理以及我们的免疫系统效应,可以使用不同的方法和显微镜。本文概述了为什么显微镜是病毒学和感染生物学的重要工具,并举例说明了不…

柯勒照明:简史介绍和设置的5个简单步骤

在任何特定光学显微镜调试当中,柯勒照明都是实现最佳成像的最重要且最基本的技术之一。尽管柯勒照明应该视为显微镜设置的常规组成部分,但是许多显微镜学家认为正确的设置过于复杂耗时,因此仍然没有被广泛应用。充分了解显微镜的两个主要部件(光阑和载物台下聚光透镜)在实际操作中的调整后,正确的设置就只需要几分钟的时间。正确对齐的显微镜可以大大改善图像的均匀对比度和照明,从而获得更高的分辨率和观察到更多的细节。在…
[Translate to chinese:] Mammalian cell culure. Phase contrast and fluorescence image.

哺乳动物细胞培养的介绍

哺乳动物细胞培养是生命科学的基本支柱之一。如果不具备在实验室中培养细胞的能力,那么细胞生物学、免疫学、肿瘤研究等学科很难实现快速发展。本文概述了哺乳动物细胞培养系统,可以根据其形态、细胞类型和组织对其进行分类。此外,还介绍了适宜的细胞生长条件以及需要使用何种显微镜来观察细胞。
[Translate to chinese:]

宽场显微镜简介

‘宽场显微镜’是最基本的显微镜技术之一。其根本上是将整个感兴趣的样本暴露于光源下,由观察者或摄像头(也可连接到计算机显示器)获得图像的技术。
[Translate to chinese:] Dronpa chromophore

光激活、光转化和光控开关荧光蛋白

荧光蛋白(FP)如GFP、YFP或DsRed都是可视化观察活细胞中细胞组分的强大工具。尽管如此,目前仍然会有传统FP达到极限的情形发生。普通FP无法观察特定兴趣蛋白中专有、空间有限的蛋白质群体,因为它们在整个细胞中都有表达。此时,光激活、光转化和光控开关荧光蛋白就登上了舞台。荧光套件中的成员可以从非荧光状态激活,可以改变发射光谱,甚至可以逆转式地“开启和关闭”。借助这些“光学荧光笔”,研究人员可以…
[Translate to chinese:] Left: Tissue cells marked with an immunolabel (FITC) illuminated with wide-band UV excitation. Note the tissue structure with blue autofluorescence. Right: Same tissue and same immunostaining with FITC label illuminated with epi-illumination using narrow-band blue (490 nm) light. Note the increased image contrast (Ploem, 1967)

Milestones in Incident Light Fluorescence Microscopy

Since the middle of the last century, fluorescence microscopy developed into a bio scientific tool with one of the biggest impacts on our understanding of life. Watching cells and proteins with the…
[Translate to chinese:] Left: Tissue cells marked with an immunolabel (FITC) illuminated with wide-band UV excitation. Note the tissue structure with blue autofluorescence. Right: Same tissue and same immunostaining with FITC label illuminated with epi-illumination using narrow-band blue (490 nm) light. Note the increased image contrast (Ploem, 1967)

Milestones in Incident Light Fluorescence Microscopy

Since the middle of the last century, fluorescence microscopy developed into a bio scientific tool with one of the biggest impacts on our understanding of life. Watching cells and proteins with the…
Mar 06, 2017
故事
Milestones in Incident Light Fluorescence Microscopy
HeLa cells stimulated with LPS. Image has been subjected to deconvolution.

Chronic Inflammation Under the Microscope

In the course of chronic inflammation certain body areas are recurrently inflamed. This goes along with many human diseases. With the help of widefield light microscopy, the underlying processes can…
Gene editing with Cas9

Gene Editing with CRISPR/Cas9 - Breakthrough in Genome Engineering

The CRISPR/Cas9 system is one of several different bacterial systems for defense against viral attacks. It consists of two main components. One is a small piece of RNA which binds to the viral target…
C. elegans

Studying Caenorhabditis elegans (C. elegans)

Find out how you can image and study C. elegans roundworm model organisms efficiently with a microscope for developmental biology applications from this article.
Infinity port

无限远光学系统

“无限远光学”这一概念是指在显微镜的物镜和镜筒透镜之间具有平行光线的光束路径。平面光学元件可以进入到这个“无限远空间”中,而不影响成像,这对于利用DIC或荧光等对比度方法至关重要。 现代显微技术需要在无限远光路中添加多种光学仪器,如光源或激光装置。满足这一需求的不同方法已经出现,本文对其进行了描述。

Handbook of Optical Filters for Fluorescence Microscopy

Fluorescence microscopy and other light-based applications require optical filters that have demanding spectral and physical characteristics. Often, these characteristics are application-specific and…
[Translate to chinese:] Center a fluorescence bulb.

视频教程: 如何调节荧光光源的灯泡位置

荧光激发的传统光源是带汞灯的荧光灯管。实现明亮均匀激发的前提条件是灯泡在灯罩内正确对中和对齐。 本视频教程介绍了一种简易的方法,用于调节荧光灯管中的汞灯的位置。
[Translate to chinese:] Exchange a fluorescence bulb.

视频教程: 如何更换荧光光源的灯泡

在生物应用中使用荧光显微镜时,带有汞灯的灯罩是最常见的光源。本视频教程展示了如何更换传统荧光光源的灯泡。

Controlling the TIRF Penetration Depth is Mandatory for Reproducible Results

The main feature of total internal reflection fluorescence (TIRF) microscopy is the employment of an evanescent wave for the excitation of fluorophores instead of using direct light. A property of the…

冷发光基础原理

自然界中有许多发光过程。冷发光是一系列发光现象的统称,是指不因高温而引发的发光事件。本文描述了不同形式的冷光并对荧光进行了详细介绍。在第二部分解释了描述荧光色素的相关技术术语,如淬灭、漂白或量子效率,以便对荧光分子的基础特性有更深入的了解。
TIRF image of brest carcinoma tumor cells expressing GFP tagged cell adhesion Molecule CD44 that is expressed on the cell membrane, imagined in TIRF.

Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy

Total internal reflection fluorescence (TIRF) is a special technique in fluorescence microscopy developed by Daniel Axelrod at the University of Michigan, Ann Arbor in the early 1980s. TIRF microscopy…
[Translate to chinese:] Jellyfish Aequorea Victoria

荧光蛋白--从起步到诺贝尔奖

荧光蛋白是近代荧光显微技术及其现代应用的基础。荧光蛋白的发现和随之而来的发展是上世纪生命科学领域最激动人心的创新之一,也是破译无数自然现象的起点。

Fluorescence Recovery after Photobleaching (FRAP) and its Offspring

FRAP (Fluorescence recovery after photobleaching) can be used to study cellular protein dynamics: For visualization the protein of interest is fused to a fluorescent protein or a fluorescent dye. A…

荧光入门介绍

荧光是George Gabriel Stokes于1852年首次报道的一种现象。他观察到萤石在紫外线照射后开始发光。荧光是光致发光的一种形式,是指一种材料被光照射后会发射出光子。发射光的波长比激发光更长。这种效应又称为斯托克斯位移。
Section taste buds rabbit, differential interference contrast microscope

Optical Contrast Methods

Optical contrast methods give the potential to easily examine living and colorless specimens. Different microscopic techniques aim to change phase shifts caused by the interaction of light with the…
[Translate to chinese:] Modulation contrast visualizes transparent, low-contrast specimens.

集成调制对比度 (IMC)

霍夫曼调制对比已成为观察未染色、低对比生物标本的标准。其创新的技术实现大大简化了操作,提高了使用的灵活性。将调制器集成到现代倒置显微镜的光束路径中,就可以使用各种明视野或相位物镜,而无需选择少量专用物镜。
[Translate to chinese:] Transgenic Mouse Embryo, GFP

显微镜中的荧光

荧光显微技术是一种特殊的光学显微镜技术。它利用的是荧光色素在一定波长的光激发下发光的能力。通过抗体染色或荧光蛋白标记,可以用这种荧光色素标记感兴趣的蛋白质。这样就可以确定单分子物种的分布、数量及其在细胞内的定位。此外,还可以进行共定位和相互作用研究,使用可逆结合染料(如 Ca2+ 和 fura-2)观察离子浓度,以及观察细胞的内吞和外吞过程。如今,利用荧光显微镜甚至可以对亚分辨率颗粒进行成像。

应用的领域

荧光

荧光是生物和分析显微镜中最常用的物理现象之一,主要是因为它具有灵敏度高、特异性强的特点。荧光是冷发光的一种形式。用户可以通过显微镜来捕捉单个荧光分子的种类、分布、数量及其在细胞内的定位。用户可以进行荧光分子共定位和相互作用的研究,也可以观察在细胞内和细胞间运作离子浓度的变化,如胞吞和胞吐。借助超高分辨显微镜,我们甚至可以对亚细胞器的结构进行成像。

显微操作

使用徕卡公司的这种简单、便捷系统,见证自动、快速的显微操作。这些完整的解决方案配备齐全的研究用倒置显微镜和电子显微操作器,操作更安全,并可减轻系统振动,节省日常工作和培训时间。

光操控

术语光操控包含一系列技术,具体是利用荧光分子的属性,启动细胞性活动,长时间观察活细胞中动态复合物的行为方式。不管是漂白、活化、转化、烧蚀,还是组合技术,研究员都需要一个能够完全执行和以高分辨率摄取细胞性活动的系统。

活细胞成像

将视角从单一的显微镜组件转向完整的活细胞成像解决方案,徕卡公司将显微镜、LAS X 成像软件、相机和第三方专用组件集成在一起,形成一个完整的活细胞成像系统。

病毒学

您的主要研究对象是病毒感染和疾病吗? 了解如何使用徕卡显微系统公司的成像和样本制备解决方案深入研究病毒学。

先进显微镜技术

先进显微镜技术包括高分辨和超分辨成像技术。这些技术主要用于以极高的分辨率将生物事件可视化,同时对样本(通常是细胞或组织)尽可能地温和。 研究人员可以在先进显微镜技术的帮助下检查和理解对生物途径、基因或蛋白质表达、疾病机制等有重大影响的生物分子。

基础显微镜技术

使用基础显微镜技术,显微镜台上的整个标本将被暴露在光源下。整个标本被白光照亮,白光可以从上面(倒置光路配置)或下面(标准正置光路显微镜)照射。根据标本的透明度和感兴趣的目标或区域,采用不同的荧光粒子来区分感兴趣的复杂细胞结构。

暗场显微镜

此外,在对材料样本进行成像时,暗场显微镜还能增强图像对比度。暗场光学对比法利用生物标本结构或材料样本的不均匀特征产生的光散射或衍射。

相差光学显微镜

使用相差光学显微镜,无需染色就可以更大对比度观察各种类型生物标本的结构。

DIC显微镜

DIC显微镜是一种宽视场显微镜,在光源镜与聚光镜之间,以及在物镜和相机传感器或目镜之间,都设有偏振滤光器和沃拉斯顿棱镜。
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